欢迎访问公司网站:www.shanghaishengwu.com或 https://shanghaishengwu.taobao.comK599发根农杆菌使用方法 - 简要介绍
本菌种来源于K599,K599发根农杆菌(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。 菌种名 | K599发根农杆菌 |
拉丁名 | Agrobacterium rhizogenes |
基因型 | Agrobacterium rhizogenes (strR ) pRi2659 (agropine type) |
代数 | 2代 |
运输形式 | 穿刺接种方式,固体培养基上生长 |
特征 | 诱导毛状根,具有链霉素抗性。 |
保存 | 含30%甘油菌液放于-80度可长期保存 |
培养基 | TY培养基 |
- 使用方法
(1)发根农杆菌(50μg/ml Str)培养基配方:Tryptone 5g, Yeast extract 3g,补水到1L体积,完全溶解后,121度、20分钟高温灭菌。配制1M的氯化钙水溶液,121度、20分钟高温灭菌。每1L 灭菌的TY液体营养液中加入10ml 无菌的1M氯化钙水溶液即可。若配制TY固体培养基,则加入15g 琼脂粉。待培养基温度至40℃以下,加入无菌抗生素至浓度为50μg/ml。(2)用接种环接种至3mL 发根农杆菌(50μg/ml Str)液体培养基中28度培养至OD600=0.50,按照照1:1的体积比加入50%甘油,按照每管200ul的量分装至1.5 mL的EP管中,-80度保存。(3)按照10%的接种量接种至100 mL 发根农杆菌(50μg/ml Str)液体培养基中28度培养至OD600=0.50,按照1:1的体积比加入50%甘油,按照每管1mL的量分装至1.5 mL的EP管中,-80度保存。(4)我们推荐保存2代,视为安全保菌方式。
目前采用的发根农杆菌主要有天然农杆碱型的A4、ATCCl5834、16834、LBA9402及
1601、R1000、R1200等人工构造质粒;还有黄瓜碱型的2635、2657、2659等;以及
甘露碱型的5196、TRl01、TR7等,每一种菌株对不同植物的发根能力是不同的。
温馨提示:不可用于临床ZL。