低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次使用说明书_详细资料

产品信息

低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次使用说明书注意事项：

1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成，也不影响PCR反应。

2．匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。

低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次使用说明书操作说明：

1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2～6h，使种子充分吸胀。

2.随机取种子100粒，沿种胚ZX线纵切为两半，将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中，备用。

3.（可选）可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min，杀死细胞，作为阴性对照。

4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液，以浸没种子为度。

5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。

6.倒出TTC染色液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种子着染况。

低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种：

（1）优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度Z高，杂质含量Z低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。

（2）分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。

（3）化学纯（CP），又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）标签。

（4）实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。

250克

对甲苯甲酸 Disodium beta-glycerol phosphate pentahydrate BR，85% M83352 250克

4-叔丁基苯甲酸 BGP FMP M83353 25克

2-氯苯甲酸 α-Glycerophosphate disodium salt hexahydrate 实用级 M83354 100克

3-氯苯甲酸 DL-α-Glycerol phosphate magnesium salt hydrate GR M83355 500克

4-氯苯甲酸 Paraffin oil AR，99% M83356 100克

2,4-二羟基苯甲酸 Linoleic acid USP级，99% M83357 500克

3,4-二羟基苯甲酸 Oleic acid AR，99% M83358 1克

3,4-二甲氧基苯甲酸 5-FOA BR，97% M83359 5克a

邻乙氧基苯甲酸 Shikimic acid BR，99% M83360 5毫克

4-氟苯甲酸 Palmitoleic acid BR，98% M83361 5克

对羟基苯甲酸 CyDTA BR，97%，油状 M83362 25克

3-碘苯甲酸 PABA BR，95%，粉末 M83363 100克

2-甲氧基苯甲酸 PABA sodium salt BR，160-180万U/g M83364 500克

3-甲氧基苯甲酸 4-Aminobenzenesulfonic acid BR，32.5万IU/g M83365 5克

4-甲氧基苯甲酸 Maleic acid USP级，50万u/g M83366 25克

N-苯基酸 Maleic acid sodium salt BR，97% M83367 100克

4-羟基苯甲酸钠 Sulfamic acid BR，97% M83368 500克

1-羟基-2-萘甲酸 EDTA BR，98%，≥10万IU/g M83369 1克

2-羟基-1-萘甲酸 EDTA-FeNa 生物技术级，98% M83370 5克

间苯二甲酸 EDTA-MgNa2 BR，98% M83371 1克

对苯二甲酸 EDTA-MgNa2 BR，98% M83372 5克

对羟 EDTA-2Na BR，99% M83373 1克

2-丁酮酸 EDTA-2NaCa BR，50% M83374 5克

苦酮酸 Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrate BR，98% M83375 25克

庚二酸 Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrate BR，98% M83376 100克

Anti-CIDEB/FITC 荧光素标记CIDEB抗体IgG   0.2ml

Anti-C-jun/AP-1 /FITC 荧光素标记原癌基因蛋白/活化蛋白1抗体IgG   0.2ml

Anti-phospho-c-Jun (Ser73) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌基因c-Jun抗体IgG   0.2ml

Anti-CK2/FITC 荧光素标记酪氨酸激酶2抗体IgG   0.2ml

Anti-CK3/FITC 荧光素标记细胞角蛋白3抗体IgG   0.2ml

Anti-CK4/FITC 荧光素标记细胞角蛋白4抗体IgG   0.2ml

Anti-CK5/FITC 荧光素标记细胞角蛋白5抗体IgG   0.2ml

Anti-PCNA(phosphos Dyr211)/FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠、大鼠、牛、兔、羊、鸡磷酸化增殖细胞核抗原抗体IgG   0.2ml

Anti-CK5/6 /FITC 荧光素标记细胞角蛋白5/6抗体IgG   0.2ml

Anti-CK7/FITC 荧光素标记细胞角蛋白7抗体IgG   0.2ml

Anti-CK7/FITC 荧光素标记抗细胞角蛋白7抗体(大、小鼠)IgG   0.2ml

低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次使用说明书Anti-CK10/FITC 荧光素标记细胞角蛋白10抗体IgG   0.2ml

Anti-CK10/RBITC 红色荧光素罗丹明标记细胞角蛋白10抗体IgG   0.2ml

Anti-CK14/FITC 荧光素标记兔抗细胞角蛋白14抗体IgG   0.2ml

Anti-CK15/FITC 荧光素标记细胞角蛋白15抗体IgG   0.2ml

Anti-CK16/FITC 荧光素标记细胞角蛋白16抗体IgG   0.2ml

Anti-CK17/FITC 荧光素标记细胞角蛋白17抗体IgG   0.2ml

Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC 荧光素标记磷酸化细胞角蛋白17抗体IgG   0.2ml

Anti-CK18/FITC 荧光素标记细胞角蛋白18抗体IgG   0.2ml

Anti-CK18(C-term) /FITC 荧光素标记细胞角蛋白18抗体（C端）IgG   0.2ml

Anti-CK18/FITC 荧光素标记细胞角蛋白18抗体IgG   0.2ml

Anti-CK19/FITC 荧光素标记细胞角蛋白19抗体IgG   0.2ml

Anti-CK19/Gold 胶体金离子标记细胞角蛋白19抗体IgG   0.2ml

Anti-CK19/FITC 荧光素标记细胞角蛋白19抗体IgG   0.2ml

Anti-CK19/RBITC 红色荧光素罗丹明标记细胞角蛋白19抗体IgG   0.2ml

Anti-CK20/FITC 荧光素标记细胞角蛋白20抗体IgG   0.2ml

低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次使用说明书

(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀

(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次

(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)

(7)10,000rpm,4℃离心20min

(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃离心20 min

(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC处理水溶解

(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)

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