4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
乙二胺四乙酸二钠盐 DTAB IND M83236 100克
乙二胺四乙酸二钠钙盐 SLS IND M83237 25毫克
乙二胺四乙酸二钠锰盐 Sodium dodecanesulfonate 色固,80% M83238 100毫克
乙二胺四乙酸二钠锌盐 Sodium dodecylbenzenesulfonate FMP M83239 1克
乙二胺四乙酸二钠铜盐 EDDAB BS M83240 25毫克
乙二胺四乙酸四钠盐 Tween 20 高纯,98% M83241 100毫克
乙二胺四乙酸二钾盐 Tween 40 高纯,98% M83242 1克
乙二胺四乙酸三钾盐 Tween 60 FMP M83243 500毫克
脂磷壁酸 Tween 65 BS M83244 1克
无水柠檬酸 Tween 80 BR,99% M83245 100毫克
α-酮戊二酸 Tween 85 BR M83246 500毫克
α-酮戊二酸钠 Triton x-100 BR M83247 1克
6-羟基多巴胺 Triton x-114 BR,85% M83248 100毫克
邻苯二胺 Triton x-200 IND M83249 500毫克
邻苯二胺盐酸 Triton x-405 色固 M83250 1克
碘代乙酰胺 Brij-35 BR,70% M83251 100毫克
腐胺 NP-40 BR,98% M83252 500毫克
甲酰胺 Antifoam OED60K 超纯,98% M83253 1克
去离子甲酰胺 Antifoam OED24K 超纯,98% M83254 5克
精胺 AMEO 超纯 M83255 25克
四盐酸精胺 GLYMO FMP,65% M83256 100克
亚精胺 MEMO 高纯,99% M83257 1公斤
三盐酸亚精胺 Silicone defoamer AR,99% M83258 5克
碘化[1-环己基-3-(3-三甲氨丙基)碳二亚胺] Amberlite CG-50 BR,98% M83259 25克
N,N-二环己基碳二亚胺 离子交换剂Ⅲ AR,98.5% M83260 100克
N,N-二异丙基碳二亚胺 离子交换剂Ⅴ BR,98% M83261 500克
N-乙基顺丁烯二酰亚胺 Decyltrimethylammonium bromide 超纯,99% M83262 5克
N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺 Proclin 300 AR,99% M83263 25克
N-溴代丁二酰亚胺 Bronorol AR,99% M83264 100克
抗体IgG 0.2ml
Anti-CD141/FITC 荧光素标记凝血调节蛋白抗体IgG 0.2ml
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个使用说明书Anti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC 荧光素标记上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-CD146(MCAN)/FITC 荧光素标记抗黑色素瘤细胞粘付分子CD146抗体IgG 0.2ml
Anti-CD158a/KIR2DL1/FITC 荧光素标记NK细胞YZ性受体2DL1抗体IgG 0.2ml
Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 荧光素标记NK细胞YZ性受体2DL3抗体IgG 0.2ml
Anti-CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC 荧光素标记NK细胞YZ性受体2DL4抗体IgG 0.2ml
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 荧光素标记NK细胞YZ性受体3DL1抗体IgG 0.2ml
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 荧光素标记NK细胞YZ性受体3DL1抗体IgG 0.2ml
Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC 荧光素标记NK细胞YZ性受体2DS4抗体IgG 0.2ml
Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 荧光素标记细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体IgG 0.2ml
Anti-CD151/MER2/PETA-3/FITC 荧光素标记CD151抗体IgG 0.2ml
Anti-CD155/PVR/FITC 荧光素标记CD155抗体IgG 0.2ml
Anti-CD160/By55/FITC 荧光素标记NK细胞受体BY55抗体IgG 0.2ml
Anti-CD161/NK1.1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD161抗体IgG 0.2ml
Anti-CD163/M130/FITC 荧光素标记CD163抗体IgG 0.2ml
Anti-CD166/ALCAM/FITC 荧光素标记活化白细胞粘附分子抗体IgG 0.2ml
Anti-CD167a/DDR1/FITC 荧光素标记CD167a抗体IgG 0.2ml
Anti-CD169/Siglec-1/sialoadhesin /FITC 荧光素标记CD169抗体IgG 0.2ml
Anti-CD170/Siglec-5/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体IgG 0.2ml
Anti-Sialic14/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素14抗体IgG 0.2ml
Anti-CD177/FITC 荧光素标记CD177抗体IgG 0.2ml
Anti-CD184/CXC-R4/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体4抗体IgG 0.2ml
Anti-CD226/DNAM-1/FITC 荧光素标记CD226抗体IgG 0.2ml
Anti-CD229/SLAMF3/FITC 荧光素标记CD229抗体IgG 0.2ml
Anti-CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC 荧光素标记CD244抗体IgG 0.2ml
Anti-TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体超家族成员13B抗体IgG
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个使用说明书(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)