柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒50 次使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒50 次使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒50 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF Thymol Blue sodium salt 电子级,98% M82921 100毫克
蓝色葡聚糖2000 BPB CP,98% M82922 100毫升
DEAE葡聚糖 Bromophenol blue sodium salt CP,98% M82923 1升
葡聚糖 Aniline blue water soluble GR,99.5% M82924 25毫克
葡聚糖T3 Toluidine blue O AR,99.0% M82925 25毫克
葡聚糖T4 Toluidine bule BR,98% M82926 100毫克
葡聚糖T5 BTB BR,98% M82927 1克
葡聚糖T6 Bromothymol blue sodium salt 高纯,98% M82928 1克
葡聚糖T7 Coomassie brilliant blue G250 BR,98% M82929 25克
葡聚糖T9 Coomassie brilliant blue R250 超纯,99% M82930 100克
葡聚糖T10 MTT 超纯,99% M82931 500克
葡聚糖T11 Trypan blue 超纯,99% M82932 5克
葡聚糖T20 Xylene cyanole FF BR,99% M82933 25克
葡聚糖T40 Xylene blue 特纯,98% M82934 100克
葡聚糖T50 Xylene cyanole FF 高纯,98% M82935 500克
葡聚糖T70 MTB 高纯,99% M82936 350ku
葡聚糖T100 Thymolphthalein BR,80% M82937 1750ku
葡聚糖T110 TPC BR,98% M82938 1克
葡聚糖T200 Alizarin complexon BR,97.5% M82939 5克
葡聚糖T500 BCIP, 2Na AR,60% M82940 25克
葡聚糖T1000 BCIP CP,98.5% M82941 1毫克
葡聚糖T2000 INT Substrate solution CP,98% M82942 5毫克
聚蔗糖70 Alcian Blue 8GX USP级,98% M82943 10克
聚蔗糖400 Fluorescamine USP级,98% M82944 25克
细胞分离液 Brilliant cresyl bulue AR,99% M82945 100克
淋巴细胞分离液 Brilliant green CP,98% M82946 500克
亲和硅烷 Light green SF yellowish AR,40-44.5% M82947 5克
淋巴细胞受体抗体IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化T淋巴细胞受体抗体IgG 0.2ml
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 荧光素标记三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体IgG 0.2ml
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒50 次使用说明书Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 荧光素标记缓激肽B2受体抗体IgG 0.2ml
Anti-BDNF/FITC 荧光素标记BDNF蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-BECN1/FITC 荧光素标记一种抑癌基因抗体IgG 0.2ml
Anti-EpCAM/CD326/FITC 荧光素标记上皮细胞特异性EpCAM/CD326蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 荧光素标记 β-酪蛋白(抗体)IgG 0.2ml
Anti-BFGF/FITC 荧光素标记碱性成纤维细胞生长因子抗体IgG 0.2ml
Anti-BGP/FITC 荧光素标记骨保护蛋白/骨钙素抗体IgG 0.2ml
Anti-Bid/FITC 荧光素标记BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-AQP-2/HRP (aquaporin Protein-2) 辣根过氧化物酶标记水通道蛋白-2抗体IgG 0.2ml
Anti-BIN1/FITC 荧光素标记桥连整合因子蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-Bim/FITC 荧光素标记细胞死亡调解子抗体IgG 0.2ml
Anti-phospho-Bim(Ser55) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞死亡调解子抗体IgG 0.2ml
Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞死亡调解子抗体IgG 0.2ml
Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞死亡调解子抗体IgG 0.2ml
Anti-BIRC5/FITC 荧光素标记细胞凋亡YZ因子5抗体IgG 0.2ml
Anti-CD203c/FITC 荧光素标记CD203c抗体IgG 0.2ml
Anti-CD203c/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记抗CD203c抗体IgG 0.2ml
Anti-BNP/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人脑钠素抗体IgG 0.2ml
Anti-CD31/HRP 辣根过氧化物酶标记CD31抗体IgG
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒50 次使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)