电泳级甘油100mL使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
电泳级甘油100mL使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
电泳级甘油100mL使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
L(-)岩藻糖 Uridine BR,98% M82562 20毫克
岩藻多糖 U 5′-P BR,98% M82563 50毫克
菊糖 5′-UMP,2Na 高纯,98% M82564 250毫克
D-甘露糖胺盐酸盐 5′-UDP 分析标准品,99% M82565 1000U
蜜二糖 5′-UDP,2Na BR,850u/mg M82566 5000U
松三糖 5′-UTP,3Na BR,99% M82567 1000U
D-(-)水杨苷 5′-UTP,4Na BR M82568 10KU
水苏糖 UDPGA BR M82569 200u
玉米淀粉 UDPG 高纯,98% M82570 500u
DL-异柠檬酸三钠盐 Guanosine 高纯,95% M82571 1000u
焦磷酸钠 5′-GMP,2Na 高纯,97% M82572 500u
焦磷酸钾 5'-GDP,2Na BR,98% M82573 2500u
葡糖酸内酯 5'-GTP,2Na USP级 M82574 500u
甜蜜素 5'-GTP,3Na USP级 M82575 500u
D-葡萄糖酸溶液 cyclic GMP 高纯,98% M82576 500u
甲基-α-D-吡喃半乳糖苷 Inosine 分析标准品,98% M82577 2000u
叶绿素铜钠盐 5′-IMP,2Na 高纯,98% M82578 500u
叶绿素B 5′-IDP,2Na BR,97% M82579 2000u
叶绿素A 5′-IDP,3Na BR,98% M82580 10KU
结晶紫 5′-ITP,3Na USP级,95% M82581 500u
瑞氏色素 dNTPs 高纯,97% M82582 5000u
姬姆萨氏色素 2′-Da 超纯 M82583 25000u
苏木色精 dAMP 超纯,98% M82584 100u
黑色素(水溶) dAMP,2Na 高纯,98% M82585 500u
黑色素(醇溶) dADP,3Na 高纯,97% M82586 300u
变色素2R dADP,2Na BR M82587 1000u
变色酸 dATP,2Na BR,98% M82588 LC1000u
变色酸二钠盐 dATP,3Na BR,98% M82589 200u
派洛宁Y 2′-dC BR,98% M82590 1000u
体IgG 0.2ml
Anti-5-HT/FITC 荧光素标记5-羟色胺抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HT/RBITC 红色罗丹明标记5-羟色胺抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTR1A/FITC 荧光素标记5-羟色胺受体1A抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTR1B /FITC 荧光素标记5-羟色胺受体1B抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTR2A/FITC 荧光素标记5-羟色胺受体2A抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTR2B/FITC 荧光素标记5-羟色胺受体2B(5-HT/serotonin R2B)抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTR3/FITC 荧光素标记5-羟色胺受体3抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTR4/FITC 荧光素标记5-羟色胺受体4抗体IgG 0.2ml
Anti-5-LOX/FITC 荧光素标记5-脂氧合酶抗体IgG 0.2ml
电泳级甘油100mL使用说明书Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) /FITC 荧光素标记磷酸化5-脂氧合酶抗体IgG 0.2ml
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) /FITC 荧光素标记磷酸化5-脂氧合酶抗体IgG 0.2ml
Anti-5-HTT/SERT/FITC 荧光素标记5-羟色胺转运蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-8-OHdG/FITC 荧光素标记兔抗8-羟基脱氧鸟苷蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-AACT-Alpha1 /RBITC 红色荧光素罗丹明标记α-1抗胰糜蛋白酶IgG 0.2ml
Anti-AACT-Alpha1/FITC 荧光素标记α-1抗胰糜蛋白酶 0.2ml
Anti-AAK1/FITC 荧光素标记AP2关联激酶1抗体IgG 0.2ml
Anti-AARS2/FITC 荧光素标记丙氨酰tRNA合成酶2抗体IgG 0.2ml
Anti-AARS2 /FITC 荧光素标记丙氨酰tRNA合成酶2抗体IgG 0.2ml
Anti-AAT/FITC 荧光素标记α-1抗胰蛋白酶抗体IgG 0.2ml
Anti-AATF/FITC 荧光素标记拮抗凋亡转录因子抗体IgG 0.2ml
电泳级甘油100mL使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)