天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次使用说明书_详细资料

产品信息

天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次使用说明书注意事项：

1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成，也不影响PCR反应。

2．匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。

天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次使用说明书操作说明：

1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2～6h，使种子充分吸胀。

2.随机取种子100粒，沿种胚ZX线纵切为两半，将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中，备用。

3.（可选）可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min，杀死细胞，作为阴性对照。

4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液，以浸没种子为度。

5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。

6.倒出TTC染色液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种子着染况。

天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种：

（1）优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度Z高，杂质含量Z低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。

（2）分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。

（3）化学纯（CP），又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）标签。

（4）实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。

重组甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

重组乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H5N1 (A/Japanese white-eye/Hong Kong/1038/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

重组甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋

NNE(Human non-neuronal enolase) ELISA Kit 人非神经元性烯醇化酶大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒 96T

DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase) ELISA Kit 人多巴胺-β羟化酶大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒 96T

CHAc(Human choline acetylase) ELISA Kit 人胆碱乙酰化酶大鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒 96T

ICD(Human isocitrate dehydrogenase) ELISA Kit 人异柠檬酸脱氢酶大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒 96T

Try- II (Human Trypsinogen-2) ELISA Kit 人胰蛋白酶原Ⅱ 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP) ELISA试剂盒 96T

ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit 人腺苷脱氨酶大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒 96T

HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明质酸酶大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒 96T

天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次使用说明书AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit 人天门冬氨酸氨基转移酶大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒 96T

ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit 人酸性磷酸酶大鼠apelin 12(AP12)ELISA试剂盒 96T

GPI(Human glucose-6-phosphate isomerase) ELISA Kit 人葡萄糖6磷酸异构酶大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 96T

PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit 人磷酸葡萄糖变位酶大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒 96T

LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒 96T

SK(Human Streptokinase) ELISA Kit 人链激酶大鼠内毒素(ET)ELISA试剂盒 96T

RNASE(Human Ribonuclease) ELISA Kit 人核糖核酸酶大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA试剂盒 96T

LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit 人过氧化脂质/乳过氧化物酶大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒

天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次使用说明书

(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀

(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次

(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)

(7)10,000rpm,4℃离心20min

(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃离心20 min

(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC处理水溶解

(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)

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