单细胞裂解液 (RNA)1mL使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
单细胞裂解液 (RNA)1mL使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
单细胞裂解液 (RNA)1mL使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
(Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 标签)
重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素
(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit 人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒 96T
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒 96T
ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ转化酶 大鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 96T
AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人抑肽酶 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 96T
Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12 大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 96T
PKA(Human Protein kinase A) ELISA Kit 人蛋白激酶A 大鼠高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒 96T
单细胞裂解液 (RNA)1mL使用说明书ADAM10(Human A Disintegrin And metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合素样金属蛋白酶10 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 96T
MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶11 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 96T
TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶 大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒 96T
TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 96T
PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶 大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 96T
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒 96T
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人单胺氧化酶 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 96T
cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞浆型磷脂酶A2 大鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒 96T
DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二胺氧化酶 大鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒 96T
COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人环加氧酶2 大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒 96T
CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit
单细胞裂解液 (RNA)1mL使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)