G-250蛋白质印迹膜快速染色液
货号GM05
原 理:常用的考马斯亮蓝 R-250 灵敏度较低,需要的染色时间比较长,而普通的银染色灵敏度高,但是过程比较烦琐,染色效果受水质和试剂纯度的影响比较大,染色液不容易保存。本试剂采用含有单一考马斯亮蓝G-250的染色液,形成的胶体状染色液不含有刺激性的甲醇和冰醋酸,安全无毒,该染色液只与蛋白结合,而与胶的结合程度低,不需要固定和脱色,只需要简单的水洗步骤。产生的蛋白条带容易观察,具有背景极低,高灵敏度、实验方便快速等特点。
在常规染色程序中,当条带蛋白量大于200ng 时可以随时观察染色条带出现的情况,30ng的蛋白条带在30钟染色和水洗后可见;而ZD能够检测出5ng左右的蛋白条带,则可以在1小时左右完成。
本试剂可以用于NC膜和PVDF膜,由染色液构成,体积为200ml,能够使用20次。
保存条件:
室温保存。
试剂盒组成: 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
GM05 | G-250蛋白质印迹膜快速染色液 | 2*100ml |
使用方法:1.将转印后的干燥或潮湿的 NC 膜在双蒸水中清洗1-2分钟,如果是干燥的PVDF,请在甲醇中浸泡数分钟,然后再浸泡在双蒸水中。
2.加入 10ml 染色液,置于摇床上,震荡染色 2-5分钟。用含 50%甲醇和 1%醋酸的脱色液脱色 4-10 分钟,重复 2-3 次,可以看到25ng左右的蛋白条带。
注意:如果需要将膜干燥保存,请将脱色后的膜放置在 10%甲醇溶液中清洗 1-2 分钟,以防止膜起皱纹。
注意事项:1、由于该染色液是胶体状悬浊液,液体中含有一些悬浮的颗粒,请在使用前将胶体状染色液瓶上下颠倒同时用手涡旋摇动混匀,使之形成均一的溶液。
2、本试剂盒所配的染色液和蒸馏水的量是针对 80×60×1mm 膜而定,若膜较大,可适当增加染色液的量和使用合适大小的染色盘,以便完全浸没凝胶。
3、如果用于 IEF 胶,请将胶用 20%TCA 进行固定30分钟,用蒸馏水冲洗凝胶三次,每次10 分钟,以去除TCA,再进行常规的染色程序步骤 2。
4、使用后,请旋紧瓶盖,防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
5、显色的凝胶,可以在蒸馏水中保存一个月而不会产生褪色,可以方便地进行拍照和保存。
6、染色三十分钟后,经过蒸馏水清洗,30ng蛋白质条带出现,如果要增加灵敏度,则需要延长染色时间1-2 小时以上,也可以染色过夜,背景不会明显增加。
7、本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床、ZL和动物体内实验等,由此产生的后果,概不承担责任。
温馨提示:不可用于临床ZL。
资料下载:
GM05G-250蛋白质印迹膜快速染色液.pdf
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