Nocodazole (microtubule inhibitor)产品描述:
诺考达唑(Nocodazole,也称为R 17934,NSC 238159)是一种化学合成的抗肿瘤药物。通过YZ微管蛋白聚合的方式,可逆干扰分裂间期和有丝分裂期细胞微管的结构形成和功能发挥 [1].细胞内高浓度诺考达唑快速诱导微管解聚,从而引起高尔基体破碎和分散进入胞质。然而低浓度诺考达唑仅改变纺锤体微管动力学,非常少或完全不会引起微管解聚现象[2-4]。细胞生物学实验室常将诺考达唑用作细胞周期同步化药物,促使有丝分裂停滞在G2/M期[5]。另外,诺考达唑还被证实可作为一些癌症相关激酶的通用YZ剂,包括ABL, c-KIT, BRAF,和MEK[6]。
基本特性:
CAS号:31430-18-9, 分子式:C14H11N3O3S, 分子量:301.3
Nocodazole (microtubule inhibitor)溶解与保存:
粉末直接保存于-20 ºC,有效期2年。DMSO溶解配制储存液(~5 mg/ml)。建议分装后-20ºC避光保存,避免反复冻存,至少可存放6个月。
使用浓度:
Nocodazole的具体使用浓度请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,细胞种类,培养特性等)进行摸索和优化。
Nocodazole (microtubule inhibitor)应用实例(仅作参考):
体外细胞培养,
1) 为了研究R 17934对微管结构和功能的影响(De Brabander MJ, 1996),定量计数分化细胞(C3H小鼠胚胎细胞MO和重组C3H小鼠胚胎细胞MO4)发现使用浓度0.04~10 µg/ml范围内的R 17934对微管的影响基本相似。临界剂量0.04 to 0.02 µg/ml R 17934显示局部影响微管形成;低于0.01 µg/mI的R 17934对微管没有任何干扰。生长的细胞,无论是细胞数目还是总蛋白内容物表达,都没有受到影响。而当使用剂量高于0.04 µg/ml,每个顿挫性分裂(abortive mitosis)产生一个多微核细胞。
R 17934使用:R 17934溶于DMSO配置5 mg/ml母液,用完全培养基进一步稀释到工作液。对照细胞加入适当浓度的DMSO。R 17934对微管结构和功能影响的使用浓度范围:0.04~10 µg/ml,受限制于药物相对来说的不可溶性,没有使用更高剂量的R 17934。
2) 为了研究分裂间期细胞中对诺考达唑(Nocodazole)对微管动力学不稳定性的YZ作用(Vasquez RJ, 1997),以newt肺上皮细胞的单一微管为研究对象,微分干涉差视频增强光学显微镜(VE-DIC)观察诺考达唑(4, 100, 或400 nM)处理细胞之前或之后2~5 min内的微管动力学。结果显示药物处理使得微管延长和缩短的速度都减慢。未处理细胞MTs,平均延长速率是4.9 µm/min;100 nM诺考达唑处理细胞MTs的平均延长速率减少至1.7 µm/min. 微管平均缩短速率由未处理细胞的14.3 µm/min经100 nM药物处理后,降至4.5 µm/min。
诺考达唑(Nocodazole)使用:Nocodazole溶于DMSO配制33.3 mM母液,分装后-20°C保存。用培养基稀释至终浓度。稀释后的工作液需放置在冰上,并且4h内使用以降低Nocodazole析出溶液的可能性。使用浓度4, 100, or 400 nM,纳摩尔(nM)水平的Nocodazole能够明显的YZnewt肺细胞中MT的延长和缩短速率。
3) 为了研究微管(Mts)解聚与高尔基体(GA)扩散的动力学关系(Minin AA., 1997),以正常人皮肤成纤维细胞(HSFs)为研究对象,培养在盖玻片上的细胞生长16-20 h后转移到含HEPEs的培养基内零度培养,并加入nocodazole (5 µM)分别处理30 min, 1 h, 1.5 h, 2 h和3 h。间接荧光染色显示药物处理30min后大部分微管去聚合。剩下的微管仍保留微管稳定亚族典型的弯曲状结构。再经过2.5h后剩下微管去聚合。C6-NBD-ceramide荧光染色显示Mts解聚开始时,GA结构完整性丧失。药物处理1h后GA扩散入细胞质,之后2h完全扩散。所以只有稳定微管仍保留在胞浆中,高尔基体才会扩散入细胞周边区域。
诺考达唑(Nocodazole)使用:Nocodazole溶于DMSO加入细胞培养基内,使用浓度5 µM,处理时间1-3 h。另外:研究发现1 µM~10 µM Nocodazole处理的细胞作用促使微管去聚合的同时诱使高尔基体元件进入胞浆。
4)细胞同步化试剂 (cell cycle synchronizing agent)
(1)诺考达唑(Nocodazole)常用作细胞同步化试剂,诱导细胞停滞在G2/M期。同步化使用常用浓度是:40-100 ng/mL, 持续作用12-18 hrs。
(2)洛伐他汀(lovastatin)用作细胞同步化试剂,诱导细胞停滞在G1期。Javanmoghadam-Kamrani S等用10µM lovastatin促使细胞停滞在G1期,约85%的细胞得以同步化。
文献来源:Javanmoghadam-Kamrani S, et al. Synchronization of the cell cycle using lovastatin. Cell Cycle. 7(15):2434-40 (2008).
Nocodazole (microtubule inhibitor)xy-12880R BOULE精子成熟相关蛋白BOULE抗体
xy-12881R BPOZ伸长因子结合蛋白抗体
xy-12882R BPY2睾丸特异性碱性蛋白Y2抗体
xy-12883R BRAF35乳腺癌易感基因2相关蛋白抗体
xy-12884R Phospho-BRCA1(Ser1280)磷酸化乳腺癌易感基因1抗体
xy-12885R Phospho-BRCA1 (Ser1387)磷酸化乳腺癌易感基因1抗体
xy-12886R Phospho-E Cadherin (Ser838 + Ser840)磷酸化上皮钙粘附分子抗体
xy-12887R Phospho-BRCA1 (Ser1466)磷酸化乳腺癌易感基因1抗体
xy-12888R BRD2BRD2蛋白抗体
xy-12889R BRD3BRD3蛋白抗体
xy-12890R phospho-Brk (Tyr447)磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/乳腺肿瘤激酶抗体
xy-12901R Phospho-BTK (Tyr551)磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗体
xy-12902R phospho-ZFP36L1 (Ser92)磷酸化EGF应答因子1抗体
xy-12864R Beta cellulinβ细胞素抗体
xy-12865R phospho-Bid (Ser78)磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体
xy-12866R BIG1ARF鸟苷酸交换因子BIG1抗体
xy-12905R BSX脑特异性同源蛋白BSX抗体
xy-12906R BTB domain containing 5锌指蛋白47抗体
xy-12907R BTBD14ABTBD14A蛋白抗体
xy-12908R BTBD15锌指蛋白851抗体
xy-12909R BTN2A1嗜乳脂蛋白2亚型A1抗体
xy-12910R Phospho-c-Fos (Ser362)磷酸化c-fos抗体
xy-12911R Phospho-c-Fos (Ser374)磷酸化c-fos抗体
xy-12913R phospho-c-Jun(Thr93)磷酸化原癌基因c-Jun抗体
xy-12914R Phospho-c-Kit (Tyr730)磷酸化原癌基因c-kit抗体
xy-15026R C1orf1481号染色体开放阅读框148抗体
xy-10006R CTLA4细胞毒性T细胞抗原-4抗体
xy-12381R CAMSAP1钙调素调节蛋白相关蛋白抗体
xy-10008R Claudin 1紧密连接蛋白1抗体
xy-15027R C1orf1491号染色体开放阅读框149抗体
xy-12915R phospho-c-Kit(Tyr823)磷酸化原癌基因c-kit抗体
xy-12916R phospho-c-Kit(Tyr568 + Tyr570)磷酸化原癌基因c-kit抗体
xy-12918R phospho-C-REL (Ser503)磷酸化淋巴细胞衍生C-型凝集素抗体
xy-15149R C2orf392号染色体开放阅读框39抗体
xy-15150R C2orf492号染色体开放阅读框49抗体
(3) 艾菲地可宁(aphidicolin, 货号:ISY1002-0001MG) 用作细胞同步化试剂,诱导细胞停滞在G1/S期或G2/M期。
应用文献来源:
[1] De Brabander MJ, et al. The effects of methyl (5-(2-thienylcarbonyl)-1H-benzimidazol-2-yl) carbamate, (R 17934; NSC 238159), a new synthetic antitumoral drug interfering with micro- tubules, on mammalian cells cultured in vitro. Cancer Res. 36(3):905-16 (1976).
[3] Vasquez RJ, et al. Nanomolar concentrations of nocodazole alter microtubule dynamic instability in vivo and in vitro. Mol Biol Cell. 8(6):973-85 (1997).
[4] Minin AA. Dispersal of Golgi apparatus in nocodazole-treated fibroblasts is a kinesin-driven process. J Cell Sci. 110 ( Pt 19):2495-505 (1997).
注意事项:
♦ 本产品为化学试剂对人体可能有害,请做好安全防护工作,避免直接接触皮肤。
♦ 本产品仅用于科研用途,禁止用于人身上。
相关产品:
温馨提示:不可用于临床ZL。