TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）产品描述

本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，广泛适用于GX的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

TOP1感受态细胞基因型：F-mcrA△(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15△lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11801ES76（100 μl × 5管）

11801ES80（100 μl × 10管）

11801-A

TOP10感受态细胞

100 μl × 5

100 μl × 10

11801-B

pUC19（0.1 ng/μl）

10 μl

10 μl

使用方法

1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

注：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用，应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

2)向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。

3) 将离心管置于42℃水浴中放置60-90s，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3min，该过程不要摇动离心管。

4) 向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min（150 rpm），目的是促使菌体复苏，抗性基因表达。

5)将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，37℃培养12-16 h。

注：涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之内可重新涂板。

运输与保存方法

干冰运输。

TOP10感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

2)为确保ZG转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。

3) 为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，ZD化实验可能遇到的风险。

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）附录一：常用抗生素工作浓度

抗生素

翊圣货号

常用工作浓度

Ampicillin 氨苄青霉素

60203ES10

100 μg/ml

Carbenicillin羧苄青霉素

60202ES08

100 μg/ml

Chloramphenicol 氯霉素

60205ES10

33 μg/ml

Kanamycin 卡那霉素

60206ES10

30 μg/ml

Streptomycin 链霉亲和素

60211ES60

25 μg/ml

Tetracycline 四环素

60212ES25

15 μg/ml

 TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）yb-hxbz-342    人前列腺癌细胞    gpc-1    规格25毫升/株.
yb-hxbz-343    人前列腺癌细胞    9L-B    规格25毫升/株.
yb-hxbz-344    人前列腺癌细胞    9L-E    规格25毫升/株.
yb-hxbz-345    人前列腺癌细胞    JCA-1    规格25毫升/株.
yb-hxbz-346    人前列腺癌细胞    VLcop    规格25毫升/株.
yb-hxbz-347    人前列腺上皮细胞    RWPE1    规格25毫升/株.
yb-hxbz-348    人前列腺上皮细胞    RWPE2    规格25毫升/株.
yb-hxbz-349    人男性正常龟头细胞系    HS68    规格25毫升/株.
yb-hxbz-350    小儿包皮细胞    HFF    规格25毫升/株.
yb-hxbz-351    人正常前列腺上皮细胞    RWPE-1    规格25毫升/株.
人血液循环系统            
yb-hxbz-352    人慢性髓原白血病细胞    K562    规格25毫升/株.
yb-hxbz-353    人白血病阿霉素耐药株    K562/Adr    规格25毫升/株.
yb-hxbz-354    人原髓细胞白血病细胞    HL60    规格25毫升/株.
yb-hxbz-355    人白血病阿霉素耐药株    HL-60/Ad    规格25毫升/株.
yb-hxbz-356    人红白细胞白血病细胞Erythroleukemia    HEL    规格25毫升/株.
yb-hxbz-357    人白血病细胞    SK    规格25毫升/株.
yb-hxbz-358    人急性早幼粒白血病细胞（悬浮）    NB4    规格25毫升/株.
yb-hxbz-359    人白血病细胞    Daudi    规格25毫升/株.
yb-hxbz-360    人白血病细胞    KG-1    规格25毫升/株.
yb-hxbz-361    人T细胞白血病细胞    6T-CEM    规格25毫升/株.
yb-hxbz-362    人T细胞白血病细胞    HuT 78    规格25毫升/株.
yb-hxbz-363    人T细胞白血病细胞    A3    规格25毫升/株.
yb-hxbz-364    人单核细胞白血病细胞    THP-1    规格25毫升/株.
yb-hxbz-365    人肥大细胞白血病细胞    CHMAS    规格25毫升/株.
yb-hxbz-366    人巨核细胞保白血病细胞    Dami      规格25毫升/株.
yb-hxbz-367    人巨细胞白血病细胞株    Mo7e    规格25毫升/株.
yb-hxbz-368    人成巨核细胞白血病细胞    MEG-01    规格25毫升/株.