DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞产品描述
本品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于GX的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性。
DH5α感受态细胞基因型:F-φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-arg ) U169 endA1 recA1 hsdR17 (rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1
产品组分
编号
组分
产品编号/规格
11802ES76(100 μl × 5管)
11802ES80(100 μl × 10管)
11802-A
DH5α感受态细胞
100 μl × 5
100 μl × 10
11802-B
pUC19(0.1 ng/μl)
5 μl × 1
5 μl × 1
运输与保存方法
干冰运输。
DH5α感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。
注意事项
1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3) 为确保ZG转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
4) 为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,ZD化实验可能遇到的风险。
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞使用方法
1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
注:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用,应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2) 向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3) 将离心管置于42℃水浴中放置45s~60s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。
4) 向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min~60min(150 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5) 将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。
注:涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存,一周之内可重新涂板。
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞附录一:常用抗生素工作浓度
抗生素
翊圣货号
常用工作浓度
Ampicillin 氨苄青霉素
60203ES10
100 μg/ml
Carbenicillin羧苄青霉素
60202ES08
100 μg/ml
Chloramphenicol 氯霉素
60205ES10
33 μg/ml
Kanamycin 卡那霉素
60206ES10
30 μg/ml
Streptomycin 链霉亲和素
60211ES60
25 μg/ml
Tetracycline 四环素
60212ES25
15 μg/ml
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞yb-hxbz-316 人宫颈癌细胞(HPV-18 永生化细胞) HeLa229 规格25毫升/株.
yb-hxbz-317 人宫颈癌细胞 Hela P10s-11F 规格25毫升/株.
yb-hxbz-318 人宫颈癌细胞 HeLa-S3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-319 人宫颈癌细胞 SiHa 规格25毫升/株.
yb-hxbz-320 宫颈癌细胞 HCE1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-321 人宫颈癌细胞 CaSKi 规格25毫升/株.
yb-hxbz-322 人子宫内膜癌细胞 RL95-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-323 人子宫鳞癌细胞(高分化) HCC 94 规格25毫升/株.
yb-hxbz-324 人子宫颈癌细胞 C-33A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-325 人前列腺癌细胞 PC-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-326 人前列腺癌细胞 PC-3M 规格25毫升/株.
yb-hxbz-327 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 1E8 规格25毫升/株.
yb-hxbz-328 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 2B4 规格25毫升/株.
yb-hxbz-329 人前列腺癌细胞 DU-145 规格25毫升/株.
yb-hxbz-330 人前列腺癌细胞 UI-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-331 人前列腺癌细胞 22RV1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-332 前列腺癌细胞 LncaP 规格25毫升/株.
yb-hxbz-333 非雄激素依赖型前列腺癌 Tsu-Prl 规格25毫升/株.
yb-hxbz-334 人胎盘绒毛癌细胞 JAR 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-hxbz-335 人绒癌细胞 JEG-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-336 人绒毛膜癌 JEG 规格25毫升/株.
yb-hxbz-337 人胎盘绒膜癌细胞 BeWo 规格25毫升/株.
yb-hxbz-338 人绒癌细胞耐药株 JEG-3/VP16 规格25毫升/株.
yb-hxbz-339 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞 JEG-3/VP16-IL-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-340 TNFa转染耐VP16绒癌细胞 JEG-3-VP16-TNFa 规格25毫升/株.
温馨提示:不可用于临床ZL。