Cy3 NHS Ester Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯

Cy3 NHS Ester Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯产品描述

Cyanine 3（Cy3），是花青素荧光素染料家族的成员之一，是化学合成的聚甲炔染料。目前Cyanine系列染料以两种异构体的形式供货，一种是非磺化花青素（non-sulfonated cyanines），一种是磺化花青素（sulfonated cyanine）。两者的光谱性质几乎一致，因此大部分应用可相互替换，比如，都可用于标记DNA或蛋白等生物分子。两者的主要区别在于：磺化染料是水溶性的，在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂，并且降低染料在水中聚集的可能性，增强标记效率。

本Cyanine 3（Cy3）是以磺化染料的形式供货，易溶于水，Ex=555 nm，Em=565 nm，具有明亮荧光，光稳定性强，pH非敏感性等优点，适用于标记多肽、蛋白以及核酸等生物分子，以通过后续荧光成像以及其他荧光生物学方法分析目的蛋白。

本Cy3 NHS ester，即含N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide）活化基团的Cy3，可直接与生化分子上的氨基（-NH2）反应形成稳定的酰胺键，主要是伯胺。

Cy3 NHS Ester Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯产品性质

英文别名（English Synonym）

Cyanine 3, monosuccinimidyl ester

分子量（Molecular Weight）

829.03

外观（Appearance）

紫色固体

Ex/Em

555nm/565nm

溶解性（Solubility）

溶于DMSO，DMF，水

结构式（Structure）
Cy3 NHS Ester Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃干燥避光保存，有效期1年。

Cy3 NHS Ester Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯注意事项

1）NHS ester基团对湿度非常敏感，务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20min。

2）NHS ester基团的水解发生在水溶性缓冲体系属于竞争性反应。对蛋白/多肽（浓度：1-1mg/ml）伯胺的连接反应建议在pH 7-9范围内进行。使用不含氨基的缓冲体系，pH 7-9。比如100 mM 磷酸钠，150 mM 氯化钠， pH 7.5； 100mM Hepes, pH 7.5。100 mM 碳酸钠/碳酸氢钠, pH 8-9；或100mM 硼酸缓冲液, pH 8-9。

3）不要使用含伯胺的任何缓冲液，比如Tris，甘氨酸。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（用Cy3-NHS Ester 标记抗体）

【注意】：可参考本方法进行多肽，蛋白或者其他分子的标记，需要根据具体的实验体系对合适的标记缓冲体系，样本浓度，染料浓度等参数做出合适的调整。

1）用不含氨基的合适的缓冲液（eg.100mM磷酸钠，150mM NaCl, pH7.5）溶解抗体使其浓度达到1-5mg/ml。【注】：如抗体中有残留Tris或 glycine 污染，则需透析或者脱盐到合适的缓冲液内。

2）使用前，用适量去离子水或者无水DMSO溶解Cy3-NHS，使其摩尔浓度为抗体摩尔浓度的400倍，例如，待标记的IgG浓度为1mg/ml（eg 6.7µM），则溶解后Cy3-NHS的浓度为2.7mM；如待标记的IgG浓度为2.5mg/ml，则溶解后Cy3-NHS的浓度为6.75mM；

3）向抗体中加入适量Cy3-NHS试剂，以达到预期的标记效率。【注】：当用Cy 3 NHS ester标记抗体或其他蛋白，亮度ZG的偶联物其染料/蛋白的比率为4-12，取决于特定的应用。过高比率会增加非特异性背景，丧失抗体特异性结合，导致聚集。建议根据应用优化标记比率。

4）室温孵育60min（或更长）；

5）利用合适缓冲液透析或脱盐柱去除未反应的试剂；

6）分别在280nm和550nm检测Cy3-抗体的吸光值；

7）测定Cy3标记效率（DOL）和标记浓度。见下公式。
Cy3 NHS Ester Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯CHO-K1    ZG仓鼠卵巢细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
COS-1    非洲绿肾    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
COS-7    非洲绿猴肾细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
CV-1    猴肾细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
IAR20    小鼠肝细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
IEC-6    大鼠小肠隐窝上皮细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
LL-PK1,    猪肾细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
MC3T3-E1    小鼠胚胎成骨细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
MDCK    狗肾细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
MEF    小鼠胚胎成纤维细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
NIH3T3    小鼠胚胎成纤维细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
P815    小鼠肥大细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
PA12    小鼠成纤维细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
RTE    大鼠气管上皮细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
SF9    昆虫卵巢细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
SMC    兔主动脉平滑肌细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
Vero    猴肾细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
WEHI-3    小鼠血液细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
Y2    小鼠成纤维细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
L6    大鼠骨骼肌成肌细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
NRK    小鼠结缔组织细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
AtT-20    小鼠垂体瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
BC3H1,    鼠脑瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
BV-2    小鼠小胶质瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
C6    大鼠脑胶质瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
Cyc-tAg    小鼠T淋巴细胞瘤（SV40T抗原转染）    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
EL-4    鼠T淋巴细胞瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
FOX-NY    小鼠淋巴瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
GH3    大鼠垂体瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
GT1.1    小鼠垂体瘤细胞（分泌促生长激素分泌激素）    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
HEPA1-6    小鼠肝癌细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
MEL    小鼠红白血病细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
MFC    小鼠前胃癌细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
MMQ    大鼠垂体瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
NG108-15    小鼠神经细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
P19    小鼠畸胎瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
PC-12    大鼠嗜铬细胞瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
RAW264.7    小鼠巨噬细胞瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
SP2/0-AG14    小鼠瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
Yac-1    小鼠淋巴瘤细胞    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
H-4-II-E    大鼠肝细胞瘤    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
L1210    小鼠淋巴细胞白血病    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周
RBL-1    大鼠嗜碱性粒细胞白血病    品PaiATCC    规格25毫升/株.    货期1-2周