SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒产品描述
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶,大大简化了制胶过程,本试剂盒可配制30-50块常规大小的凝胶。
SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒产品组分
编号
组分名称
产品编号/规格
保存方式
20328ES50(30~50 gels)
20328ES72(150~250 gels)
20328-A
30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,29:1
100ml
500 ml
4℃避光
20328-B
4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液,pH8.8
70ml
350ml
4℃
20328-C
4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH6.8
30ml
90ml
4℃
20328-D
APS 过硫酸铵
0.5g
2.5g
4℃~25℃
20328-E
TEMED 四甲基二乙胺
0.5ml
2.5ml
4℃~25℃避光
运输与保存方法
室温运输。4℃~25℃保存,有效期至少6个月。
SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒注意事项
1) 丙烯酰胺溶液和TEMED有毒,请适当防护。
2) APS溶液不稳定,当配制成10%溶液后,分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间,以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长,需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
3) TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。
4) 凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下,可通过适当调节TEMED以及APS的用量,控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
5) 温度较低时,4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。
6) 凝胶配制过程,特别是液体混匀步骤,需尽量避免气泡的产生。
7) 在分离胶上层进行水压时需小心操作,加水速度不宜过快。
8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】;
2. 按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶,制胶程序如下:
2.1 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
2.2 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免气泡产生;
2.3 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液,对于mini胶,分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,从而压平凝胶表面;
2.4 静置30-60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面,表面凝胶已聚合;
3. 按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶,制胶程序如下:
3.1 去除覆盖在分离胶上的水层。
3.2 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
3.3 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3.4 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
3.5 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3.6 静置10-20min,等待浓缩胶聚合。
3.7 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
3.8 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】,然后进行上样和后续的常规电泳操作。
SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒yb-12551R AttractinAttractin蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12552R Phospho-Aurora B(Tyr12)磷酸化有丝分裂激酶B抗体 浓度1mg/ml
yb-12529R ARPM1肌动蛋白相关蛋白M1抗体 浓度1mg/ml
yb-12565R ABH1ALKB蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12566R ACAA1乙酰辅酶A酰基转移酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-12581R phospho-beta Actin (Tyr53)磷酸化β-肌动蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12978R phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346)磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR 抗体 浓度1mg/ml
yb-12979R phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356)磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体 浓度1mg/ml
yb-10130R APOD载脂蛋白D抗体 浓度1mg/ml
yb-2586R ASIC1/BNaC2/ASIC1A酸敏感离子通道1抗体 浓度1mg/ml
yb-2168R ADAR1 (C-terminus)双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(C端) 浓度1mg/ml
yb-3696R AF10髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体 浓度1mg/ml
yb-3681R ADCY1腺苷酸环化酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-3680R APC腺瘤样息肉抗体 浓度1mg/ml
yb-5023R AGPAT1溶血磷脂酰基转移酶抗体 浓度1mg/ml
yb-9098R ANKS3锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体 浓度1mg/ml
yb-3047R phospho-ALK (Tyr1586)磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 浓度1mg/ml
yb-5018R ACADVL酰基辅酶A脱氢酶很长链抗体 浓度1mg/ml
yb-7735R AMSH信号转导衔接结合蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-7736R ASB3锚蛋白重复序列-细胞因子信号YZ物盒蛋白家族3抗体 浓度1mg/ml
yb-2750R Aurora C有丝分裂激酶B抗体 浓度1mg/ml
yb-3045R Phospho-Ack1 (Tyr284)磷酸化Ack1抗体 浓度1mg/ml
yb-3046R Phospho-Ack1 (Tyr326)磷酸化Ack1抗体 浓度1mg/ml
yb-3048R Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412)磷酸化βYZ蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-3050R Phospho-Aurora A (Thr288)磷酸化有丝分裂激酶A抗体 浓度1mg/ml
yb-3003R phospho-APS(Ser598)磷酸化APS抗体 浓度1mg/ml
yb-2749R Aurora A有丝分裂激酶A抗体 浓度1mg/ml
yb-5986R AIM2干扰素诱导蛋白AIM2抗体 浓度1mg/ml