稳定细胞株筛选服务稳定转染是将外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选。建立稳定的细胞系,是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选。最常用的真核表达基因载体的标志物有潮霉素(hygromycin)、新霉素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用Hygromycin B、G418和puromycin进行选择性筛选。筛选得到的细胞株可稳定表达目的蛋白。
普健生物提供: 载体构建服务,或对已构建好的外源质粒DNA进行稳定筛选。针对质粒DNA的抗性标志,选择相应的药物,并对所需筛选的细胞进行药物测试,选择细胞全部凋亡时药物的ZD浓度。瞬时转染感染细胞后,在适当的药物浓度条件下进行细胞筛选。10-14天后,挑取单克隆,扩增后通过ELISA,SDS-PAGE, Western Blot等技术手段检测蛋白表达水平,进一步筛选出稳定细胞株。
稳定稳定细胞株服务流程:1. 载体构建:将外源基因构建到合适的载体上。
2. 筛选浓度测定:以 10-14 天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度。
3. 细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进 行转染当天细胞应达到 60%-80% 覆盖。
4. 细胞转染:用构建好的载体转染目的细胞。
5. 抗生素筛选。
6. 鉴定筛选结果。
客户需要提供:
1. 构建好的外源基因载体或基因模板。
2. 告知需构建的细胞系。
普健生物的优势:1. 稳定:保证15代以内稳定转染细胞稳定表达。
2. 经济:价格实惠,性价比高。
3. 质量保证:对外源基因进行严格鉴定。
交付结果:1. 构建好的外源基因载体。
2. 构建好的稳定细胞系。
服务内容: 服务编号 | 服务内容 | 服务周期 | 价格(¥) |
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咨询与订购:电话:027-87433958,15071237056
邮件:service@atagenix.com
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