操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
产品名称:Ac-DEVD-pNA (Caspase 3显色底物)供应商
规格:25mg
储存条件:—20℃,12个月
用途:又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
注意事项:无菌溶液,经过滤CJ处理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA组成,含酚红。自备材料:
1、 PBS、Hanks液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
注意事项:
1、 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 贴壁细胞的消化:
a.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA),略盖过细胞,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)重新消化。 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
a.不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。 附录:不同胰酶细胞消化液的比较和选择
1. 如果希望消化能力比较强,推荐选择C0201胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红),这两种胰酶细胞消化液都含有EDTA,消化能力相对更强一些。
2. 如果希望观察比较方便,推荐选择含酚红的C0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红)和C0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含EDTA)。
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析,推荐选择不含酚红的C0201 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。
4. 对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含EDTA的C0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含EDTA)。
5. 对于胰酶特别敏感的细胞,即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况,推荐选择C0202胰酶细胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红)。
CKLFH5英文名称:beta Amyloid 1-28山羊脑啡肽(ENK)免疫试剂盒
CCDC64B英文名称:Aurora B山羊免疫球蛋白M(IgM)免疫试剂盒
CLLD8英文名称:Aggrecanase-2山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒
CKLFH6英文名称:ADAM10山羊免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒
CNIH3英文名称:ASB9山羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)免疫试剂盒
CNKSR1英文名称:ASB8山羊口蹄疫抗体(FMDV IgM)免疫试剂盒
CNKSR2英文名称:ABP1山羊可的松(Cortisone)免疫试剂盒
CNKSR3英文名称:ACTR1A山羊抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)免疫试剂盒
Ac-DEVD-pNA (Caspase 3显色底物)供应商DCTN1英文名称:CXCL5人ICOS配体(ICOSLG)免疫试剂盒
Desmoglein 1英文名称:CD97人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)免疫试剂盒
DLC1英文名称:CD99/E2 antigen人I 型胶原蛋白(COL I)免疫试剂盒
DRGX英文名称:CD151人H-钙粘着蛋白/H-钙粘连蛋白(H-Cad/CDH13)免疫试剂盒
DeltaD英文名称:CD155/PVR人HSP60 IgM抗体免疫试剂盒
DAT1英文名称:CXCL15/Lungkine人HSP60 IgG抗体免疫试剂盒
DOK3英文名称:CD163/M130人HSP60 IgA抗体免疫试剂盒
DCUN1D2英文名称:CD66a人H-ras 免疫试剂盒