需要自备的器材:
1.转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
以下是转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格的订购信息:
产品名称 | 规格 | 价格 |
转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格 | 50T | 电询 |
转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
PCR检测试剂盒:
(一)转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-15min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
技术概论:
转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
PCR反应体系与反应条件
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
以下是公司正在的产品:
磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forPhospholipaseA2ActivatingProtein(PLAA)
干扰素调节因子9(IRF9)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forInterferonRegulatoryFactor9(IRF9)
Dermokine蛋白(DMKN)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forDermokine(DMKN)
黑素亲和素(MLPH)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forMelanophilin(MLPH)
免疫球蛋白M(IgM)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forImmunoglobulinM(IgM)
白蛋白(ALB)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forAlbumin(ALB)
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forVonWillebrandFactorADomainContainingProtein3A(vWA3A)
封闭蛋白3(CLDN3)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forClaudin3(CLDN3)
胞浆磷蛋白2(STMN2)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forStathmin2(STMN2)
神经介素S(NMS)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应 forNeuromedinS(NMS)
白介素1δ(FIL1δ)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
白介素1δ(FIL1δ)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
白介素1ε(IL1ε)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
白介素1ζ(IL1ζ)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
白介素1η(IL1η)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
白介素1θ(IL1θ)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
转基因植物35S基因PCR检测试剂盒规格U14-GFP(小鼠子细胞)5×106cells/瓶×2SW1088[SW-1088;SW1088](人脑星型胶质瘤细胞)
CM-R124大鼠脉络膜血管细胞完全培养基100mL
VTCN1OthersMouse小鼠B7-H4/B7S1/B7x人细胞裂解液(阳性对照)
FO小鼠瘤细胞MousemyelomacelllineFODMEM培养基+10%FBS
IL12A&IL12BProteinMouse重组小鼠IL-12(IL12A&IL12BHeterodimer)蛋白
小鼠肾小管平滑肌细胞完全培养基100mL
ADM(ProAM-N20)肾上腺髓质素抗体(N端20肽)规格:0.2ml
ADMR肾上腺髓质素受体抗体规格:0.1ml
ADNP/NAP活性依赖的神经保护肽抗体规格:0.2ml
ADORA3腺苷受体A3抗体规格:0.2ml
ADO2-氨基乙硫醇双加氧酶抗体规格:0.2ml