人脂蛋白相关磷脂酶A2Elisa Kit说明书

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人脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）Elisa KitHuman lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
人脂蛋白相关磷脂酶A2Elisa Kit说明书【实验用途】Lp-PLA2(lipoprotein-associated phospholipase A2脂蛋白相关磷脂酶A2)，人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp—PLA2）又称血小板活化因子乙酰水解酶（PAF—AH），主要由巨噬细胞合成和分泌。大部分Lp—PLA2与低密度脂蛋白结合，能水解灭HX小板活化因子，水解低密度脂蛋白上的氧化磷脂，生成溶血卵磷脂和氧化型游离脂肪酸，因此既有KY抗动脉粥样硬化，又有促炎促动脉粥样硬化的作用。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TLp-PLA2显色。TLp-PLA2在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

试剂配制:
1、人脂蛋白相关磷脂酶A2Elisa Kit说明书酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
注意事项：
1加样：
①人脂蛋白相关磷脂酶A2Elisa Kit说明书实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与ZX孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
现货供应　角蛋白12(KRT12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　角蛋白13(KRT13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　角蛋白14(KRT14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　角蛋白15(KRT15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　角蛋白16(KRT16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　角蛋白17(KRT17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　再生蛋白Ⅳ(REG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　再生蛋白Ⅳ(REG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　生蛋白Iα(REG1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　再生蛋白Iα(REG1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　型磷脂酶A2(pPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　特异转录因子1α(PTF1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　促胰液素(SCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　骨成型蛋白10(BMP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　自身免疫调节因子(AIRE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　5羟色胺转运蛋白(SERT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T

现货供应　组织蛋白酶G(CTSG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　规格：　48T/96T
人脂蛋白相关磷脂酶A2Elisa Kit说明书微量 RNA 定量试剂盒-20℃保存现货供应

微量DNA助沉剂-20℃保存DNADOWN现货供应

微量RNA助沉剂-20℃保存RNADOWN现货供应

微量丙二醛测试盒/脂质过氧化物测试盒常温保存Oxidative Stress Detection Kit现货供应

微量单链 DNA 定量试剂盒-20℃保存现货供应

微量蛋白沉淀试剂盒常温保存Mini Protein Precipitation Kit现货供应

微量核酸沉淀剂室温保存NA Precipitation Solution现货供应

微量双链 DNA 定量试剂盒-20℃保存现货供应

微量样品核酸提取试剂盒4℃保存Tiny Sample DNA-RNAOUT现货供应

微量样品核酸提取试剂盒4℃保存Tiny Sample DNA-RNAOUT现货供应

微球菌核酸酶-20℃保存Micrococcal Nuclease 现货供应
操作步骤：
1）人脂蛋白相关磷脂酶A2Elisa Kit说明书运用前，将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。
2）依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。
3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。
8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。
9）在450nm波利益测定各孔的OD值。