流行性出血热汉坦病毒PCR检测试剂盒规格

流行性出血热汉坦病毒PCR检测试剂盒规格特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
以下是流行性出血热汉坦病毒PCR检测试剂盒规格的订购信息：

需要自备的器材：
1．流行性出血热汉坦病毒PCR检测试剂盒规格仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

PCR检测试剂盒：
流行性出血热汉坦病毒PCR检测试剂盒规格总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-15min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
技术概论：
流行性出血热汉坦病毒PCR检测试剂盒规格聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
PCR反应体系与反应条件
标准的PCR反应体系：
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
以下是公司正在的产品：
花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forArachidonate-5-Lipoxygenase(ALOX5)  

再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forRegeneratingIsletDerivedProtein3Gamma(REG3g)  

防御素β123(DEFβ123)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forDefensinBeta123(DEFb123)  

釉原蛋白Y-连锁(AMELY)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forAmelogenin,Y-Linked(AMELY)  

Ⅲ型胶原(COL3)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forCollagenTypeIII(COL3)  

CD320分子(CD320)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forClusterOfDifferentiation320(CD320)  

神经降压素(NT)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forNeurotensin(NT)  

多肽-N-酰氨基半乳糖转移酶2(GALNT2)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forPolypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase2(GALNT2)  

甾醇-O-酰基转移酶2(SOAT2)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forSterol-O-Acyltransferase2(SOAT2)  

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应  forCarbonicAnhydraseII(CA2)  

Reprimo蛋白(RPRM)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应　

REST辅YZ因子1(RCOR1)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应　

REST辅YZ因子2(RCOR2)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应　

REST辅YZ因子3(RCOR3)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应　

RET原癌基因(RET)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应　

Rho GDP解离YZ因子α(ARHGDIα)(酶联免疫吸附试验法)  现货供应　
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