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细胞名称 人腺泡上皮癌;HPAC说明书
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3~1:6传代,3~4天换液1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:11;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:19,23;D3S1358:15,17;D5S818:12;D7S820:10,12;D8S1179:12,14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:10,11;vWA:15,17;
同工酶
染色体
使用权限 B类
人腺泡上皮癌;HPAC说明书操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人腺泡上皮癌;HPAC说明书注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
人腺泡上皮癌;HPAC说明书美国菌种保藏ZX, 又称美国模式菌种收集ZX(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上zui大的生物资源ZX,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源ZX。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human euglobulinlysis (EL) ELISA Kit 人优球蛋白(EL)ELISA试剂盒
Humanlowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit 人低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AgELISA试剂盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织谷胱甘肽(GLATHIONE)总浓度荧光定量检测试剂盒50次
HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠抗存活素抗体(Ai-Surv)ELISA试剂盒 ,英文名: Ai-Surv ELISA Kit
Monkey adrenomedullin (ADM) ELISA Kit 猴子肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒
RatCompleme4,C4ELISAKit 大鼠补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFree-T3(HumanFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit人游离三碘甲状腺原氨酸规格:48T/96T
细胞活化凝血因子10(FACTORXa)活性荧光定量检测试剂盒20次
Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒 ,英文名: LTβ ELISA Kit
人组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA检测试剂盒Humaissuepolypeptidespecificaigen,TPSELISAKit 96T/48T
大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)免疫试剂盒 Rat Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA kit
英文名称RatTissuePolypeptideAigenELISAKit大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISAKit规格:96T/48T
钙离子膜通道内质网肌醇1,4,5-三磷酸受体(IP3R)功能荧光检测试剂盒20次
ELISAKitILK-1人整合素连接激酶1规格:48T/96T
NELL2 Others Human 人 NELL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人细胞;Hela 229 [HeLa229]
CM-R038大鼠肝内胆管上皮细胞完全培养基100mL
Ca Ski, 人细胞 非洲绿猴肾细胞,CV-1(M)细胞 PA-1(人卵巢畸胎瘤细胞)
小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9
NAALADL1 Others Human 人 NAALADL1 人细胞裂解液 (阳性对照)
Calu-3 人肺腺癌细胞 1ml/T75
GLC-82 人低分化肺腺癌细胞 1ml/T75
NCI-H209 人小细胞肺癌细胞 1ml/T75
NCI-H2227 人小细胞肺癌细胞 1ml/T75
人腺泡上皮癌;HPAC说明书大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6
人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]
CTNNB1 Others Human 人 beta-Catenin / CTNNB1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
S-180细胞,腹水瘤细胞 人结肠癌细胞,CRL-2780细胞 非洲绿猴肾细胞;VERO
上皮细胞生长添加物-2EpiCGS-2
SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人细胞裂解液 (阳性对照)