实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,ZH通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括JD定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的JD定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | 猪巴贝斯虫厂家 |
英文名称 | Babesia trautmanni |
编号 | FS-R1121 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以ZD引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/6/3340137484939481944-14.png)
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/6/3340137508561625982-14.png)
核糖核酸酶(牛胰)25克 PorcineHyaluronicacid,HAELISA试剂盒猪透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1910-42-5甲基紫精 98%Paraquat dichloride HumanActivinA,ACV-AELISA试剂盒人活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1-Dodecanethiol正十二100克AR,99% Humanai-rubellavirusIgMaibody,ai-RVIgMELISAKit人抗风疹病毒IgM抗体(ai-RVIgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
反式-2-羟基肉桂酸 2-Hydroxycinnamic acid, predominantly ... 614-60-8 5G 标准品 人白介素15(IL-15)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
DL-色安醋;DL-胰化蛋柏安基醋;DL-色安基醋;DL-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;DL-安基吲哚炳醋 DL-Tryptophcn ;DL-2-cMino-3-indolqpropionic ccid;DL-2-cMino-3-indolylpro-pcnoic ccid;DL-β-3-Indolyl clcninq;(±)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid 1924-1-6 兔子硫氧化还原蛋白(x)免疫试剂盒 Rabbit Thioredoxin,x ELISA Kit
TG-SDSBUFFER,10XREADY-PACKTG-SDS缓冲液粉末超级白色粉末RTsigma 全组织乙酰胆碱脂酶活性染色试剂盒10次
74-83-9溴(阴凉)metxyl bromide ELISAKitSCA人抗类固醇细胞抗体规格:48T/96T
心浸液琼脂25毫升2~8℃ 大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA试剂盒 ,英文名: MUC1 ELISA Kit
N,N'-二甲基脲 N,N′-Dimethylurea,≥99% 96-31-1 100G 通用试剂 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA检测试剂盒Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T
酶 Catalase from bovine liver (2-5KU/MG) 9001-5-2 1G 酶和辅酶 大鼠白介素6(IL-6)免疫试剂盒 Rat Ierleukin 6,IL-6 ELISA KIT
potewwiumACETATE,3M,PH5.0醋酸钾溶液生物技术级1LRT 大鼠神经颗粒素(NG/GN)ELISA试剂盒 ,英文名: NG/GN ELISA Kit
氢氧化镍 Nickel(II) hydroxide 12054-48-7 100G 通用试剂 人成纤维细胞生长因子23(FGF-23)ELISA检测试剂盒Humanfibroblastgrowthfactor-23,FGF-23ELISAKit 96T/48T
角鲨烯 Squalene,≥98% 111-02-4 25ML 通用试剂 大象孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒 Elepha Progesterone,PROG ELISA Kit
5-氮杂胞嘧啶核苷,英文名或英文缩写:5-Azacytidine,级别:超,99%,规格:25克 CLIAKitforPlaHumanVitaminC,VCELISAKit植物维生素C规格:48T/96T
7699-45-8溴化锌;无水溴化锌Zinc broMide 石蜡切片组织衰老特异性早期脂褐素苏丹黑原位直接染色试剂盒50次
猪巴贝斯虫厂家2-amino-4,5,6,7-tetraxy7no-6-metxylbenzo[b] thiopxene-3-carboxyl 1022396-45-7 脑膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸检测试剂盒 48T
柠檬酸三丁酯 Tributyl citrate,≥97.0% 77-94-1 100ML 通用试剂 CLIAKitforMousemucin-5subtypeB,MUC5BELISAkit小鼠粘蛋白/粘液素5B规格:48T/96T
水合茚三同 Ninhydrin hydrctq 482-47- 体液胱氨酸(cystine)含量GX液相色谱法定量检测试剂盒20次
Orcein苔红素500毫克AR,85% ELISAKit26SPSM人26S蛋白酶体规格:48T/96T
14002-80-3羟基基乙酸xy7noXYPIVALIC ACID metxYL ESTER 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。