48T/96T 鸡传染性脑脊髓炎(IE)ELISA试剂盒

鸡传染性脑脊髓炎(IE)ELISA试剂盒

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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断,具体说明书请联系客服索取，本说明书是通用模板，有些数据不准确.

鸡传染性脑脊髓炎(IE)ELISA试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

鸡传染性脑脊髓炎(IE)ELISA试剂盒

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生里盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱鸡传染性脑脊髓炎(IE)ELISA试剂盒

操作注意事项

1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，终结果乘以5才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

名称 96孔配置 48孔配置 备注

微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无

样本稀释液 6mL 3mL 无

检测抗体-HRP 10mL 5mL 无

20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释

底物A 6mL 3mL 无

底物B 6mL 3mL 无

终止液 6mL 3mL 无

封板膜 2张 2张 无

说明书 1份 1份 无

自封袋 1个 1个 无

注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度：Z低检测浓度小于（参考说明书）

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6个月

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。

严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

本品为科研试剂，只对单位实验室学校等正规用途出售。

如需资料请向客服索取！

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血液制品系列：各种动物血清（人血清、新生牛血清、标准马血清、特级马血清、山羊血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、大牛血清、小牛血清、猪血清、狗血清、猫血清、鱼血清、驴血清、豚鼠血清、大鼠血清、小鼠血清、巴比西鼠血清）

动物血浆：人血浆、新生牛血浆、大牛血浆、小牛血浆、绵羊血浆、山羊血浆、猪浆、驴血浆、马血浆、狗血浆等等。

动物红细胞：绵羊红细胞，兔血红细胞，鸡血红细胞，豚鼠血红细胞等，浓度可定做。

抗血清系列：兔抗牛血清白蛋白（免疫血清/抗血清）

兔抗牛酪蛋白（免疫血清/抗血清）

兔抗卵清蛋白（免疫血清/抗血清）

兔抗人血清白蛋白（免疫血清/抗血清）

羊抗乙肝e抗原（免疫血清/抗血清）

羊抗乙肝表面抗原（免疫血清/抗血清）

羊抗乙肝核心抗原（免疫血清/抗血清）

兔抗FITC（免疫血清/抗血清）

山羊抗小鼠IgGH+L（免疫血清/抗血清）

山羊抗兔IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗小鼠IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗人IgM（H+L）（免疫血清/抗血清）

兔抗狗IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗猪IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗鸡IgYIgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗马IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗山羊IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗人IgGFC（免疫血清/抗血清）

兔抗猴IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗牛IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗豚鼠IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗大鼠IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗鸭IgYIgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗猫IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗人IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

兔抗绵羊IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

山羊抗人IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

山羊抗鸡IgYIgG（h+l）（免疫血清/抗血清）

山羊抗猪IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

山羊抗人IgGFC（免疫血清/抗血清）

山羊人IgM（H+L）（免疫血清/抗血清）

山羊抗人IgGFab（免疫血清/抗血清）

兔抗驴IgG(H+L)（免疫血清/抗血清）

山羊抗树鼩IgG（H+L)(免疫血清/抗血清）

细胞冻存专用DMSO（冻存验证通过）