小鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒
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本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断,具体说明书请联系客服索取,本说明书是通用模板,有些数据不准确.
小鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
小鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生里盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱小鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无小鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
封板膜 2张 2张 无小鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒
自封袋 1个 1个 无
注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:Z低检测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
本品为科研试剂,只对单位实验室学校等正规用途出售。
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血液制品系列:各种动物血清(人血清、新生牛血清、标准马血清、特级马血清、山羊血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、大牛血清、小牛血清、猪血清、狗血清、猫血清、鱼血清、驴血清、豚鼠血清、大鼠血清、小鼠血清、巴比西鼠血清)
动物血浆:人血浆、新生牛血浆、大牛血浆、小牛血浆、绵羊血浆、山羊血浆、猪浆、驴血浆、马血浆、狗血浆等等。
动物红细胞:绵羊红细胞,兔血红细胞,鸡血红细胞,豚鼠血红细胞等,浓度可定做。
甲氧基PEG戊二酸 mPEG-GA 1K、2K、4K、5K、10K、20K
甲氧基PEG丁二酸 mPEG-SA 1K、2K、4K、5K、10K、20K
甲氧基PEG羧基 mPEG-COOH 1K、2K、4K、5K、10K、20K
甲氧基PEG乙酸 mPEG-Acetic Acid,MPEG-AA 1K、2K、4K、5K、10K、20K
甲氧基PEG丙酸 mPEG-PA 1K、2K、4K、5K、10K、20K
乙酸PEG乙酸 Acetic Acid-PEG-Acetic Acid,AA-PEG-AA 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
丙酸PEG丙酸 PA-PEG-PA 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
戊二酸PEG戊二酸 GA-PEG-GA 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
丁二酸PEG丁二酸 SA-PEG-SA 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
双羧基PEG HOOC-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
四臂PEG丁二酸 4-Arm PEG-SA 2K、5K、10K、20K
四臂PEG羧基 4-Arm PEG-COOH 2K、5K、10K、20K
四臂PEG乙酸 4Arm-PEG-Acetic Acid,4-Arm-PEG-AA 2K、5K、10K、20K
四臂PEG丙酸 4-arm-PEG-PA 2K、5K、10K、20K
八臂PEG戊二酸 8-Arm PEG-GA 10K、20K、40K
八臂PEG丁二酸 8-Arm PEG-SA 10K、20K、40K
八臂PEG羧基 8-Arm PEG-COOH 10K、20K、40K
八臂PEG乙酸 8-Arm-PEG-Acetic Acid,8-Arm-PEG-AA 10K、20K、40K
八臂PEG丙酸 8-arm-PEG-PA 10K、20K、40K
羟基PEG羧基 HO-PEG-AA,HO-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
叠氮PEG羧基 Azide-PEG-AA,N3-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
马来酰亚胺PEG羧基 Mal-PEG-AA,MAL-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
丙烯酸酯PEG羧基 Acrylate-PEG-AA,DA-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
丙烯酰胺PEG羧基 AcA-PEG-AA,ACA-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
生物素PEG羧基 Biotin-PEG-AA,Biotin-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
巯基吡啶PEG羧基 OPSS-PEG-AA,OPSS-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
Boc-PEG羧基 Boc-PEG-AA,BOC-NH-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
Fmoc-PEG羧基 Fmoc-PEG-AA,FMOC-NH-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
炔烃PEG羧基 Alkyne-PEG-AA,ALK-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
N-羟基琥珀酰亚胺酯PEG羧基 SCM-PEG-AA,SCM-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
氨基PEG羧基 Amine-PEG-AA,NH2-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
巯基PEG羧基 Thiol-PEG-AA,HS-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
活性酯PEG羧基 NHS-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
硅烷PEG羧基 Silane PEG acid, Silane-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
N-二硬脂酰磷脂酰乙酰胺PEG羧基 DSPE PEG Acid, DSPE-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
胆固醇PEG羧基 Cholesterol PEG acid, CLS-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
叶酸PEG羧基 Folic acid PEG acid, FA-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
荧光素PEG羧基 Fluorescein PEG acid, FITC-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
罗丹明PEG羧基 Rhodamine PEG Acid, RB-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
CY5.5-PEG羧基 Cy5.5 PEG acid, Cy5.5-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K
CY3.5-PEG羧基 Cy3.5 PEG acid, Cy3.5-PEG-COOH 1K、2K、3.4K、5K、10K、20K