人siglec-5(siglec-5)ELISA试剂盒
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本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断,具体说明书请联系客服索取,本说明书是通用模板,有些数据不准确.
人siglec-5(siglec-5)ELISA试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人siglec-5(siglec-5)ELISA试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
人siglec-5(siglec-5)ELISA试剂盒
4. 组织匀浆:将组织加入适量生里盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
人siglec-5(siglec-5)ELISA试剂盒
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
人siglec-5(siglec-5)ELISA试剂盒
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
封板膜 2张 2张 无
自封袋 1个 1个 无
注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:Z低检测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
本品为科研试剂,只对单位实验室学校等正规用途出售。
武汉纯度生物科技有限公司,产主要生产销售实验室常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、细胞因子等产品研发与销售。
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血液制品系列:各种动物血清(人血清、新生牛血清、标准马血清、特级马血清、山羊血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、大牛血清、小牛血清、猪血清、狗血清、猫血清、鱼血清、驴血清、豚鼠血清、大鼠血清、小鼠血清、巴比西鼠血清)
动物血浆:人血浆、新生牛血浆、大牛血浆、小牛血浆、绵羊血浆、山羊血浆、猪浆、驴血浆、马血浆、狗血浆等等。
动物红细胞:绵羊红细胞,兔血红细胞,鸡血红细胞,豚鼠血红细胞等,浓度可定做。
二级淋巴组织趋化因子
人α2巨球蛋白(A2M)
血管紧张素转化酶
血管紧张素转化酶2
脂联素
激活素A
解整合素样金属蛋白酶9
解整合素样金属蛋白酶12
金属肽酶含血小板反应蛋白1
金属肽酶含血小板反应蛋白4
金属肽酶含血小板反应蛋白13
聚蛋白多糖
系统无
系统无
系统无
血管生长素
血管生成素1
血管生成素2
血管生成素样蛋白3
血管生成素样蛋白4
淀粉样蛋白βA4
系统无酪氨酸蛋白激酶受体UFO
天青杀素
B细胞活化因子
脑源性神经营养因子
双糖链蛋白聚糖
骨成型蛋白2
骨成型蛋白4
骨成型蛋白7
β细胞素
补体成分1q受体
碳酸酐酶Ⅸ
神经钙黏蛋白
组织蛋白酶B
组织蛋白酶E
组织蛋白酶S
CC趋化因子配体1
趋化因子C-C-基元配体3
趋化因子C-C-基元配体7
趋化因子C-C-基元配体8
趋化因子C-C-基元配体13
趋化因子C-C-基元配体14
趋化因子C-C-基元配体15
趋化因子C-C-基元配体16
趋化因子C-C-基元配体17
趋化因子C-C-基元配体18
趋化因子C-C-基元配体20
趋化因子C-C-基元配体23
趋化因子C-C-基元配体25
趋化因子C-C-基元配体27
CD10分子
CD13分子
CD23分子
CD26分子
CD27分子
CD31分子
CD32分子
CD36分子
CD40分子
CD40配体
CD56分子
CD80分子
CD105分子
CD127分子
CD163分子
CD200分子
CD244分子
CD320分子
癌胚抗原
癌胚抗原相关细胞粘附分子1
补体因子D
凝聚素
肝细胞生长因子受体
睫状神经营养因子
软骨寡聚基质蛋白
补体片断5a
Corin蛋白
补体受体2
半胱氨酸丰富分泌蛋白3
C-反应蛋白
心肌营养素1
细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4
CXC趋化因子配体1
CXC趋化因子配体5
CXC趋化因子配体7
CXC趋化因子配体9
CXC趋化因子配体10
CXC趋化因子配体11
CXC趋化因子配体13
CXC趋化因子配体14
CXC趋化因子配体16
富含半胱氨酸蛋白61
半胱氨酸蛋白酶YZ剂;胱抑素B
半胱氨酸蛋白酶YZ剂;胱抑素C
核心蛋白聚糖
Dickkopf 1
Dickkopf 3
Delta-like ligand 1
E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白
表皮生长因子
表皮生长因子受体
内分泌腺来源的血管内皮生长因子
皮肤衍生肽酶YZ因子3
细胞外基质金属蛋白酶诱导因子
内皮素
嗜酸性粒细胞趋化蛋白
嗜酸性粒细胞趋化蛋白2
血管内皮细胞蛋白C受体
促红细胞生成素
V-Erb B2红白血病病毒癌基因同源物2
E选择素
内皮细胞特异性分子
系统无
脂肪酸合成酶
胎球蛋白A
成纤维细胞生长因子1
成纤维细胞生长因子4
成纤维细胞生长因子9
成纤维细胞生长因子19
成纤维细胞生长因子21
成纤维细胞生长因子23
纤维胶凝蛋白1
纤维胶凝蛋白2
纤维胶凝蛋白3
卵泡抑素样蛋白3
FMS样酪氨酸激酶3配体
系统无
纤连蛋白
卵泡抑素
叶酸受体1
趋化因子
卵泡抑素样蛋白1
系统无弗林蛋白酶
半乳糖凝集素2
半乳糖凝集素3
系统无
半乳糖凝集素4
半乳糖凝集素7
半乳糖凝集素9
粒细胞趋化蛋白2
粒细胞集落刺激因子
粒细胞集落刺激因子受体
生长分化因子15
胶质细胞系来源的神经营养因子
生长激素
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
糖蛋白130
系统无
颗粒溶素
颗粒酶B
肝素结合性表皮生长因子
肝细胞生长因子
热休克蛋白27
细胞间粘附分子1
细胞间粘附分子2
细胞间粘附分子3
干扰素