一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次操作步骤产品及特点:
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法,但是单独配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
2. 安全,将实验人员接触粉末状丙烯酰胺的可能降到zui低。
3. 灵活,分开提供的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺便于配制各种比例和浓度的 SDS-PAGE,满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4. 使用改良的浓缩胶缓冲液,由于其含有染料,制备的浓缩胶呈蓝色,便于上样时识别加样孔。
5. 电泳后可直接用于考染、银染、Western 杂交等实验。
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次操作步骤详细说明书:
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/6/636360740519472928415.jpg)
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次操作步骤对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入 PMSF, 使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。
3. 按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是 比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次操作步骤对于培养细胞样品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入 PMSF, 使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。
2. 裂解细胞 2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血 清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后,细胞就会被裂解。 2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分 裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔细胞加入 150 微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高 可以适当加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
离析酶R-101克RT
Phytagel 50g/100g/250g/500g Sigma P8169
银片/银,英文名或英文缩写:Silver,级别:BR,97%,规格:25克
;巴比通;巴比特鲁;佛罗拿;5,5-二基巴比土醋;二基炳二酰脲 Bcrbitcl;5,5-Diqthyl-2,4,6(1H,3H,5H)-pyriMidinqtrionq;DiqthylMclonylurqc;Vqroncl;Mcloncl 27-44-3
喹诺酮,英文名或英文缩写:2-xy7noxyinoneoline,级别:AR,98%,规格:1克
透析用玻璃纸100毫克保存:-20℃
61791-12-6聚氧醚(35)蓖麻油Polyoxyl 35 Castor Oil
ANODEBUFFER阳极缓冲液,10X超纯级1LRT
酵母膏 Yeast extract 8013-1-2 250G 培养基
2-酚-3.6-二磺醋二内 Diwo7ium 2-ncphthol-3,6-disulfonctq 132-21-3
ACRIFLAVINE,NEUTRAL丫啶黄素超纯级深橙色颗粒或粉末RTsigma
X-Glucoside 25mg原装/100mg原装 INALCO1758-0500
SDS-PAGE蛋白质中分子量shēng huà shì jì容量:100克
4-溴本醇, 99% 4-Bromobqnzyl clcohol 873-72-6
N,N-二乙基甲先胺shēng huà shì jì容量:50毫克
CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C
草鱼肾细胞;GIK
T24细胞,膀胱移行细胞癌细胞 子宫高分化鳞癌细胞,HCC细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755
SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人细胞裂解液 (阳性对照)
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C
CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
草鱼肾细胞;GIK
T24细胞,膀胱移行细胞癌细胞 子宫高分化鳞癌细胞,HCC细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755
SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人细胞裂解液 (阳性对照)
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次操作步骤CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人腺泡上皮癌;HPAC
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞 [CIP 104786]细胞 293 [HEK-293] (人胚肾细胞)
人T淋巴瘤转基因细胞;Jurkat D,E
RDFs, 大鼠成纤维细胞