无去垢剂细胞裂解液100ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
无去垢剂细胞裂解液100ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
FGF1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白
大鼠小肠隐窝上皮细胞完全培养基 100mL
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人细胞裂解液 (阳性对照)
A3人T淋巴细胞白血病细胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
人肺成纤维细胞HPF
B16-F1(小鼠黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人星形胶质细胞HA
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6
CPM Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 人细胞裂解液 (阳性对照)
BxPC-3 人原位腺癌细胞
293XL-hTLR7人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR7 DMEM+10% Hyclone 灭HX清+10 μg/ml Blasticidin
NOG Protein Human 重组人 Noggin / NOG 蛋白 (His 标签)
人前列腺平滑肌细胞(HPSMC)(5×105) 细胞名称 种属
人肺动脉成纤维细胞 (HPAF)( 5×105 )
人羊膜细胞;WISH
CL-0317AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞)5×106cells/瓶×2
人胃癌细胞;MGC-803 大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL
Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人类呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠前列腺素D2(PGD2)ELISA试剂盒 ,英文名: PGD2 ELISA Kit
人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA检测试剂盒HumanNeuralcelladhesionmoleculeligand1,NCAM-L1ELISAKit 96T/48T
鱼热休克蛋白90(HSP-90)免疫试剂盒 Fish Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit
CLIAKitforPF-4/CXCL4(RabbitPlaetFactor4)ELISAKit兔子血小板因子4规格:48T/96T
食物糖精(saccharin)含量比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitFSH人促卵泡素规格:48T/96T
人载脂蛋白A4(apo-A4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat major histocompatibility complex class II (MHC II /AgB /H-1 II) ELISA Kit 大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒
HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TSGFELISAKit 人特异生长因子/相关因子(TSGF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanInsulinReceptorβ,ISR-βELISA试剂盒人胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织基质金属蛋白酶(MMP-9)活性荧光定量检测试剂盒20次
HumanLegionellaantibodyIgA,LPAb-IgAELISAKit人军团菌抗体IgA(LPAb-IgA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
无去垢剂细胞裂解液100ml售后服务大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠胆固醇(CH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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