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SDS-PAGE 电泳液(5X)100ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
SDS-PAGE 电泳液(5X)100ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
XCL1 Protein Human 重组人 XCL1 蛋白 (His 标签)
人肝星形细胞完全培养基 100mL
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照)
Lewis细胞,小鼠肺癌细胞 CHL/IU [ CHL-11 ](ZG仓鼠肺细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A
人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H157
Raji(人Burkitt's淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0378MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)5×106cells/瓶×2
EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠肺成纤维细胞完全培养基 100mL
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞 3T6-Swiss albino mouse embryo fibroblasts DMEM培养基+10%FBS
IL36G Protein Human 重组人 IL36G / IL1F9 蛋白
NCI-H2452(人间皮瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 SW620(结肠癌细胞)
NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人神经细胞HN
豹猫肺成纤维样细胞;LCL1
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0 食管癌细胞,TE-1细胞 PK-15细胞,猪肾细胞系
人成纤维细胞;HFF
HA Others H8N4 甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 ,英文名: NGAL ELISA Kit
人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒HumanMousemyeloperoxidase-antineutrophilcytoplasmicantibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T
大鼠波形蛋白(VIM)免疫试剂盒 Rat vimentin,VIM ELISA Kit
CLIAKitforTLR-9/CD289ELISAkit大鼠Toll样受体9规格:48T/96T
全组织免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗)20次
ELISAKitASA人抗皮肤抗体规格:48T/96T
兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat inhibin B (INH-B) ELISA Kit 大鼠YZ素B(INH-B)ELISA试剂盒
Humananti-rubellavirusIgGantibody,anti-RVIgGELISAKit 人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RVIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanGlypican-3,GPC-3ELISA试剂盒人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织丁酰胆碱酯酶活性荧光定量检测试剂盒20次
HumanMidkine,MKELISAKit人中期因子(MK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
SDS-PAGE 电泳液(5X)100ml售后服务猴超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猴白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猴α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装