Tris缓冲盐溶液(20×TBS,pH7.4)500ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
Tris缓冲盐溶液(20×TBS,pH7.4)500ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
CXCL10 Protein Human 重组人 CXCL10 / Crg-2 蛋白
人肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL
ORM2 Others Human 人 ORM2 人细胞裂解液 (阳性对照)
APP-PS1细胞,人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293) 宋内氏志贺氏菌(Sh.sonnei) 山羊肾上皮样细胞;DG-K1
小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C 3T3
OS-RC-2(人肾癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照)
人癌细胞;SK-BR-3
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人细胞裂解液 (阳性对照)
F344大鼠间质干细胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells
U373细胞,人脑胶质瘤细胞系 福氏志贺氏菌(Shigella flexneri) 人无色素睫状上皮细胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg
SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
HEC-1-B(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2 散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人少突胶质前体细胞-悬浮生长RNAHOPC-os miRNA5 μg
兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF
HRT-S1细胞,人结肠癌细胞 人横纹肌肉瘤细胞,TE671 subline No.2细胞 小鼠源细胞
HL-7702(人肝正常细胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人髓样分化因子88(MyD88)免疫试剂盒 Human MyD88 ELISA Kit
转氢酶-1 紫外分光光度法 50管/48样
RatTriggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,TREM-1ELISA试剂盒大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanLipopolysaccharides,LPSELISA试剂盒人脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanorosomucoid,ORMELISAKit人类粘蛋白(ORM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兔儿茶酚胺(CA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human trypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒
Humanmorbillivirus,MVELISAKit 人麻疹病毒(MV)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglutathione,GSHELISA试剂盒人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织单胺氧化酶B型(MAO-B)活性荧光定量检测试剂盒20次
Humanmorbillivirus,MVELISAKit人麻疹病毒(MV)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Tris缓冲盐溶液(20×TBS,pH7.4)500ml售后服务鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡白痢抗体检测(PD)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡白介素9(IL-9)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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