昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒50T实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒50T实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒50T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
CX3CL1 Protein Canine 重组狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 标签)
人脐带单核细胞完全培养基 100mL
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照)
143TK细胞,人胸腺激酶缺陷性细胞系 鼠伤寒沙门氏菌Ta100 大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0
MG-63(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人细胞裂解液 (阳性对照)
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910
ENPP7 Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人细胞裂解液 (阳性对照)
MV3 人黑色素瘤细胞
MG-63人骨肉瘤细胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培养基(GIBCO)+10%优质热灭活FBS
DKK1 Protein Rhesus 重组恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 标签)
人胚肺成纤维细胞;HFL1 人淋巴成纤维细胞完全培养基 100mL
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照)
人导管癌细胞;HCC38
COLO 205 人结肠癌细胞
U-2 OS-EGFP+puro人骨肉瘤细胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
CD40LG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)
人视网膜内皮细胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支气管上皮细胞系 Human
小鼠脱氢酶(XDH)ELISA试剂盒 ,英文名: XDH ELISA Kit
人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA检测试剂盒HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit 96T/48T
大鼠胃蛋白酶(PG)免疫试剂盒 Rat Pepsin,PG ELISA Kit
英文名称RatCyclinD2ELISAKit大鼠细胞周期素D2(CyclinD2)规格:96T/48T
核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)GX液相色谱(HPLC)分析试剂盒20次
ELISAKitCH50人血清总补体规格:48T/96T
兔内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒
HumanRotavirusantigen,RVAgELISAKit 人轮状病毒抗原(RVAg)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA试剂盒人胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织长链脂酰辅酶A脱氢酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanMyeloidProgenitorInhibitoryFactor1,MPIF-1ELISAKit人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒规格:96T/48T
昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒50T实验方法绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装