昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒100T免费代测使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒100T免费代测操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒100T免费代测实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
CX3CL1 Protein Canine 重组狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白
人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL
PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
SMC-1细胞,人胸膜瘤细胞 鼠伤寒沙门氏菌Ta98 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E
ZG仓鼠肺细胞;CHL
MFC(小鼠胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 C2 / Complement Component 2 人细胞裂解液 (阳性对照)
豚鼠皮肤细胞;GP-S3
ENTPD1 Others Mouse 小鼠 CD39 / ENTPD1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0089H9c2(2-1) (大鼠心肌细胞)5×106cells/瓶×2
MiaPaCa-2, 人癌细胞 非雄激素依赖型前列腺癌,Tsu-Pr1细胞 ZR-75-1(癌细胞)
小鼠细胞;FDC-P1
SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人细胞裂解液 (阳性对照)
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人成纤维细胞总RNAHMF tRNA
狗肾细胞隆突型;MDCK superdome
PANC-1细胞,人癌细胞 人横纹癌细胞,A673细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF
HO-8910(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(人淋巴细胞分离液) 100ml
大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)免疫试剂盒 Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISA Kit
H2S含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶YZ因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4,LILRB4ELISA试剂盒人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanomentinELISAKit人网膜素(omentin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human plaet factor 3 (PF-3) ELISA Kit 人血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒
HumanLegionellapneumophilaantigen,LPAgELISAKit 人军团菌抗原(LPAg)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA试剂盒人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织长链脂酰辅酶A合成酶(ACYLCOASYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
Humanmyeloperoxidase,MPOELISAKit人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
昆虫核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒100T免费代测绵羊生长激素(GH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
绵羊雌二醇(E2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
绵羊表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装