Heidenhain铁苏木素染色试剂盒3X100ml售后服务使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
Heidenhain铁苏木素染色试剂盒3X100ml售后服务操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
Heidenhain铁苏木素染色试剂盒3X100ml售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
PC-3(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21
CNTN1 Others Mouse 小鼠 Contactin 1 / CNTN1 人细胞裂解液 (阳性对照)
NCI-H1688细胞,人经典小细胞肺癌细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化),PC-12细胞 CM-H135人脉络膜微血管细胞完全培养基100mL
大鼠肾小管上皮细胞RRTEpiC
Promocell C-28021 Hematopoietic Progenitor CellExpansion Medium DXF, 造血祖细胞扩展培养基DXF 500ml
人食道上皮细胞裂解物HEEpiCL
HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15]
Acc-2细胞,涎腺腺样囊性癌细胞 人胃腺癌细胞,MGC-803细胞 兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C3
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
PAK3 Others Human 人 PAK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人肝内胆管上皮细胞总RNAHIBEpiC tRNA
ZG仓鼠卵巢细胞;TPO-CHO-I
SMC-1细胞,胸膜细胞瘤 早幼粒急性白血病细胞系,HL-60细胞 小鼠子细胞;U14
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP
CD200 Others Mouse 小鼠 CD200 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠多聚免疫球蛋白受体(PIGR)ELISA试剂盒 ,英文名: PIGR ELISA Kit
人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA检测试剂盒Humanheartfattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素D合成酶(PGDS)免疫试剂盒 Rat Prostaglandin D Synthase,PGDS ELISA Kit
英文名称RatantinuclearantibodyELISAKIT大鼠抗核抗体(ANA)规格:96T/48T
酵母/真菌D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒20次
ELISAKitVB6人维生素B6规格:48T/96T
小鼠白介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒
HumanintactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancardiacankyrinrepeatdomain1,ANKRD1ELISA试剂盒人心肌锚蛋白重复域1(ANKRD1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
重组腺病毒载体转染试剂盒10次
HumanSolubleClusterofdifferentiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Heidenhain铁苏木素染色试剂盒3X100ml售后服务人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胃粘液素(GM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装