Thomas磷钼酸苏木素染色试剂盒200ml售后服务使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
Thomas磷钼酸苏木素染色试剂盒200ml售后服务操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
Thomas磷钼酸苏木素染色试剂盒200ml售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-N87(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人原胚肾转化细胞;293 Ad5
CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人细胞裂解液 (阳性对照)
HNE3细胞,人鼻咽癌细胞 小鼠淋巴瘤细胞,EL4细胞 CM-H022人前列腺成纤维细胞完全培养基100mL
上皮细胞培养基-2EpiCM-2-prf
Promocell C-26030 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2, 肾上皮细胞生长培养基2型(即用型) 500ml
小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20
ICOS Others Mouse 小鼠 ICOS / AILIM / CD278 人细胞裂解液 (阳性对照)
CNE-2 低分化鼻咽癌细胞
BxPC-3人原位腺癌细胞 BxPC-3 in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS
FASLG Protein Human 重组人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 (His 标签)
人心脏成纤维细胞( HCF) ( 5×105 ) GC-1, 鼠精原细胞 Mouse
PRLR Others Rat 大鼠 PRLR / Prolactin receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肺腺癌细胞;Calu-3
ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞
CW-2人结肠腺癌细胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
TNFSF13 Protein Mouse 重组小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 标签)
人脂肪细胞-皮下(HPA-s)(1×106 ) Raji,人Burkitt's淋巴瘤细胞 Human
大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人信号传导子及转录激活子6(STAT6)免疫试剂盒 human STAT6 ELISA Kit
酸脱羧酶(PDC)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样
Ratmacrophageinflammatoryprotein1β,MIP-1βELISA试剂盒大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanHaptoglobin,Hpt/HPELISA试剂盒人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanleukocyteantigenA,HLA-AELISAKit人类白细胞抗原A(HLA-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠白介素9(IL-9)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human hyaluronidase (HAase) ELISA Kit 人透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒
HumantrypsinELISAKit 人胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCalcitonin,CISA试剂盒人降钙素(CT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
中性红复染试剂盒50次
Humansolubleprotein185,sp185/HER-2ELISAKit人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Thomas磷钼酸苏木素染色试剂盒200ml售后服务人胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胸表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装