我司黏蛋白染色试剂盒(温和甲基化法)2×50ml实验方法本着标准*、质量*、服务*、信誉*的宗旨,为客户提供轻松便捷,安全可靠的网上采购模式!我们将竭诚为您服务,咨询!
黏蛋白染色试剂盒(温和甲基化法)2×50ml实验方法实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
黏蛋白染色试剂盒(温和甲基化法)2×50ml实验方法注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人细胞裂解液 (阳性对照)
CNE细胞,人鼻咽癌细胞 鼠瘤细胞,SP2/0-Ag14细胞 恒河猴皮肤细胞;RM-S1
黑色素细胞生长添加物(不含TPA)MelGS-2
Promocell C-24110 Melanocyte Growth Medium KIT, 黑色素细胞生长培养基套装 500ml
CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2
IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基 100mL
U266人瘤细胞 U266 human myeloma cell 1640+15% FBS
IL33 Protein Canine 重组狗 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白
NCI-H2227(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 KG-1(白血病细胞)
GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人肺微血管内皮细胞cDNAHPMEC cDNA
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4
TE-11细胞,食管癌细胞 人食管癌细胞,CaEs-17细胞 大鼠外分泌腺细胞;AR42J
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠17-羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒 ,英文名: 17-OHP ELISA Kit
人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA检测试剂盒Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 96T/48T
大鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)免疫试剂盒 Rat Low Density Lipoprotein cholesterol,LDL-C ELISA kit
CLIAKitforTS(Humanthymidylatesynthetase)ELISAKit人胸苷酸合成酶规格:48T/96T
胚胎干细胞胰岛细胞定向分化试剂盒5次
H2A-H2B人抗组蛋白规格:48T/96T
小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat heat shock protein 27 (HSP-27) ELISA Kit 大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒
HumanCreatineKinase,CKELISAKit 人肌酸激酶(CK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCA724ELISA试剂盒人标志物(CA724)ELISA试剂盒规格:96T/48T
质粒/蛋白制备样品内毒素比色法定量检测试剂盒20次
Humansolubletransferrinreceptor,sTfRELISAKit人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
黏蛋白染色试剂盒(温和甲基化法)2×50ml实验方法人血管紧张肽酶(Angiotensinase)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管紧张素Ⅱ转化酶(ACEⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装