我司细胞色素氧化酶染色试剂盒(对苯二铵法)5×50ml实验方法本着标准*、质量*、服务*、信誉*的宗旨,为客户提供轻松便捷,安全可靠的网上采购模式!我们将竭诚为您服务,咨询!
细胞色素氧化酶染色试剂盒(对苯二铵法)5×50ml实验方法实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
细胞色素氧化酶染色试剂盒(对苯二铵法)5×50ml实验方法注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
KLE(人子宫内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3A1
SLAMF1 Others Rat 大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人细胞裂解液 (阳性对照)
QGY-7703细胞,人肝癌细胞 人羊膜细胞,WISH细胞 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106
人气管上皮细胞cDNAHTEpiC cDNA
Promocell C-28010 Mesenchymal Stem CellGrowth Medium, 间充质干细胞生长培养基(即用型) 500ml
猴肾细胞;vero IgRCD4-
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0205Sf-9(昆虫细胞)5×106cells/瓶×2
Dami细胞,巨核细胞 人分泌A2抗体B淋巴细胞,BB7.2细胞 人导管癌细胞;HCC38
A673(人横纹肌瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人细胞裂解液 (阳性对照)
人非小细胞肺癌细胞;NCI-H23
HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞
M17细胞,神经母细胞瘤细胞 非雄激素依赖型前列腺癌细胞,Tsu-Prl细胞 人神经束膜细胞RNAHPC miRNA5 μg
非洲绿猴肾细胞;VERO
EPOR Others Human 人 EPOR / Erythropoietin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人旋毛虫抗体(Trichinella Ab)免疫试剂盒 Human Trichinella antibody ELISA Kit
人抗DNA酶B抗体(anti-DNase B)ELISA试剂盒 ,英文名: anti-DNase B ELISA Kit
Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISA试剂盒大鼠白血病YZ因子(LIF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISA试剂盒人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanLaminin,LNELISAKit人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠雌激素(E)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9) ELISA Kit 人糖链抗原19-9(CA19-9)ELISA试剂盒
HumanPlasminogen,PlgELISAKit 人纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
humanBeta-Endorphin,β-EPELISA试剂盒人β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物总ATP酶(totalATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanTcellreceptor,TCRELISAKit人T细胞受体(TCR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞色素氧化酶染色试剂盒(对苯二铵法)5×50ml实验方法人孕激素/孕(PROG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人鱼精蛋白(Protamine)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装