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Delafield苏木素染色液100ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
Delafield苏木素染色液100ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
Hep 3B(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照)
SW116细胞,人大肠癌细胞 人葡萄膜黑色素细胞,UM细胞 人结直肠腺癌细胞;Caco-2
人角膜上皮细胞RNAHCEpiC miRNA5 μg
AGRP Others Human 人 AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照)
绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP
IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人细胞裂解液 (阳性对照)
MA-891 小鼠癌高转移细胞
BT-474 [BT474]人导管癌细胞 BT-474 [BT474] human breast ductal carcinoma cells 1640+10% FBS
VSTM1 Protein Human 重组人 VSTM1 蛋白 (Fc 标签)
人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF 人肺大动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
FGF21 Others Mouse 小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 人细胞裂解液 (阳性对照)
人表皮黑色素细胞-中色素cDNAHEM-m cDNA
AAV-293 人胚肾细胞
CL-0214SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
MA, 小鼠星形胶质细胞
Sars结构蛋白表达株;293 001B 人肾系膜细胞完全培养基 100mL
大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒 ,英文名: sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit
人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA检测试剂盒HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKIT 96T/48T
食蟹猴C肽(C-Peptide)免疫试剂盒 Cynomologus Monkey C-Peptide ELISA Kit
CLIAKitforOPGL(MouseOsteoprotegerinLigand)ELISAKIT小鼠骨保护素配体规格:48T/96T
糖果糖精(saccharin)含量紫外光谱法定量检测试剂盒20次
ELISAKitAGPs人阿拉伯半乳糖蛋白规格:48T/96T
小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat brain derived neurotrophic factor (BDNF) ELISA Kit 大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒
Humanpapillomavirus,HPVELISAKit 人状瘤病毒抗体(HPV)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAspartateaminotransferase,ASISA试剂盒人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物源性食品芹菜(cellery)基因检测试剂盒20次
Humanthymidylatesynthetase,TSELISAKit人胸苷酸合成酶(TS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Delafield苏木素染色液100ml售后服务兔抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装