Caspase 9 活性检测试剂盒-荧光100T使用说明书使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
Caspase 9 活性检测试剂盒-荧光100T使用说明书操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
Caspase 9 活性检测试剂盒-荧光100T使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
Ana-1(小鼠巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0157MG-63(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照)
L-M TK细胞,鼠胸腺激酶缺陷细胞株 人B细胞淋巴瘤细胞系,BJAB细胞 小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
猪肾传代细胞;IBRS-2
EGFR Others Human 人 EGFR / ErbB1 人细胞裂解液 (阳性对照)
荷兰黑白花奶牛牛肺细胞;DCL1
IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照)
人小气道上皮细胞完全培养基 100mL
Rb细胞,人视网膜母细胞瘤 宛氏拟青霉 人癌细胞;MDA-MB-468
ANGPT2 Protein Human 重组人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 标签)
Lec1(仓鼠卵巢细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 B7-H3 / CD276 人细胞裂解液 (阳性对照)
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人细胞裂解液 (阳性对照)
盘羊皮肤细胞;ASHS2
人支气管成纤维细胞完全培养基 100mL
Y79细胞,人视网膜母细胞瘤 球毛壳霉 小鼠肺腺癌细胞系;LA795
CXCL3 Protein Human 重组人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白 (His 标签)
Lncap clone FGC(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠磷酸化cAMP反应元件结合蛋白1(pCREB1)ELISA试剂盒 ,英文名: pCREB1 ELISA Kit
人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA检测试剂盒HumanFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 96T/48T
其它ELISA试剂盒
CLIAKitforOT/BGP(MouseOsteocalcin/Boneglaprotein)ELISAKit小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白规格:48T/96T
糖蛋白电泳高碘酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIANBLUE)染色试剂盒5次
ELISAKitIL-15人白介素15规格:48T/96T
小鼠核因子κBYZ蛋白α(IKB-α)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌标志物CA125 ELISA试剂盒
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humananti-Nogo-Aantibody,NOGO-AAbELISA试剂盒人NOGO-A抗体(Nogo-AAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物酸性磷酸酶总活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanUltraSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生长激素(US-GH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Caspase 9 活性检测试剂盒-荧光100T使用说明书小鼠促性腺素释放素受体(GnRHR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠促上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装