产品名称:一抗稀释液(Western)100ml使用说明书
储存条件:长期-20℃保存;短期2-8℃保存。
有效期:六个月。
产品简介:
抗体稀释液适用于蛋白印迹时抗体的稀释和配制。本WB抗体稀释液,添加了多种抗体保护剂,可以增加抗体的活性和稳定性,减少抗体的非特异性结合,降低非特异性的背景着色,提高试验的特异性和灵敏度。
一抗稀释液(Western)100ml使用说明书使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
一抗稀释液(Western)100ml使用说明书操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
一抗稀释液(Western)100ml使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
远志Radix Polygalae Tenuifoliside A 远志糖甙 139726-35-5 C33H40O17 ≥98%
异丁香酚Isoqugqnol97-24-120mg
萝卜流素;莱菔流烷;1-异流青基-4-甲基亚流酰基丁烷 Sulforaphane 4478-93-7 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
对照品头孢泊肟酯130517-200401含量测定
异苦参酮 Isokurarinone HPLC≥98% 用于含量测定
28523-86-6 七扶烷标准品(特殊运输) 1ml
冬凌草速Rubescensinep2617-37-220mg
Corchoionoside C (6S,9S)-长寿花糖甙 185414-25-9
维库溴铵相关物质B标准品50587-95-6 15mg维库溴铵相关物质B标准品
常山乙素;Febrifugine 24159-07-7 20mg 订购|咨询
24634-61-5 山梨酸钾标准品 1g
野马追内酯AEupatoriumlindleyanumlactoneAHPLC≥98%;20mg/支
Dixy7noperaksine 二轻派利文减 16100-84-8
索他洛尔相关化合物B标准品50mg索他洛尔相关化合物B标准品
维生素B2;纯品型;标准品;有证书 83-88-5 0.25g 订购|咨询
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