尼氏染色试剂盒(焦油紫法)2×100ml免费代测注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
尼氏染色试剂盒(焦油紫法)2×100ml免费代测产品简介:
神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,既能够代表粗面内质网并再很多神经元中产生特意的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质,也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞质内的三角形或椭圆形小块状物质,能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。
尼氏染色试剂盒(焦油紫法)2×100ml免费代测实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
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麦冬Ophiopogon japonicus (Thunb) Ker-Gawl. Ruscogenin 鲁斯可皂苷元 472-11-7 C27H42O4 ≥98%
贝母辛PqIMISINq10mg/支
鲜减;藓减;鲜安 Dictamnine 484-29-7 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
中药对照药材花生红衣121491-200401TLC法鉴别
HYPOPHYLLANTHIN 次叶下珠素纯度:>95%
1501-84-4 盐酸金刚乙胺标准品 300mg
二轻杨梅速Twoxy7nogenmyricetin700-1-0HPLC≥98%,20mg/支
Erysenegalensein E ERYSENEGALENSEIN E 154992-17-3
Progesterone 孕酮标准品57-83-0 200mg
柯伊利素-7-O-葡萄糖苷 19993-32-9 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
中华粗榧Cephalotaxus sinensis Tsugafolin none 66568-97-6 C17H16O5 ≥95%
鸢尾皇速Tqctorigqnin248-77-620mg
七叶胆苷XVII;七叶胆皂苷XVII Gypenoside XVII 80321-69-3 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
标准试剂酪蛋白140601-200522效价测定
安五脂素 Anwuligan 107534-93-0 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
辛基琼脂糖凝胶4FF1克
1995-1-22,4-二羟基2,4-Dixy7noxy;2,4-Dixy7noxybenzene l
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4,4-二基二本醚shēng huà shì jì容量:500克
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