委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养

委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传 

中文名称 委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养 

属名 Streptomyces

种名加词 venezuelae var.spiralis

收藏时间 1990-8-18

原始编号 ATCC40204

模式菌株 非模式菌株

主要用途 a:2:{i:0;s:4:分类;i:1;s:4:研究;}

特征特性 在淀粉琼脂培养基上气生菌丝体为灰白、杏仁黄，基内菌丝灰白、杏仁黄、淡茧黄，无可溶性色素，菌落形态为圆形、凸起、粉状；孢子丝轮生、初级螺旋，孢子椭圆形 ；胨化牛奶；液化明胶；淀粉水解；在酪氨酸培养基上产色素；在柴斯纳培养基上不产硫化氢；不利用棉子糖、葡萄糖、蔗糖；利用麦芽糖、肌醇、甘露醇、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖，纤维素上生长；细胞壁含有DL-2.6二氨基庚二酸、甘氨酸、葡萄糖、核糖。

具体用途 分类 研究

生物危害程度 四类



委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤CJ：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 

委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h

委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养菌株操作：

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。

小鼠成肌细胞 泡盛曲霉 Aspergillus awamori C2C12

人脂肪细胞完全培养基 百脉根根瘤菌 Rhizobium loti

荧光威客酵母 Wickerhamia fluorescens One Step Western Kit HRP (Mouse)/一步法快速WB(HRP)试剂盒(鼠)

枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis 嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila

HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞) 大豆慢生根瘤菌

台湾根霉 Rhizopus formosensis 人晶体上皮细胞

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti 酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人眼脉络黑色素瘤细胞 谷氨酸棒杆菌Ⅹ型 Agrobacterium tumefaciens MuM－2B

EC109，人食管细胞 苏云金芽胞杆菌山东亚种 Bacillus thuringiensis subsp. shandongiensis

鼠杆菌 Lactobacillus murinus 小鼠肺成纤维细胞完全培养基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 香菇 Lentinula edodes α-Zearalenol （3S,7R,11E）-3,4,5,6,7,8,9,10-octahydro-7,14,16-trihydroxy-3-methyl-1H-2-benzoxacyclotetradecin-1-one

CZC-8004 （5 mg） Dianilinopyrimidine-01； N2-

（+）-Evodiamine （50 mg） D-Evodiamine； 8,13,13bS,14-tetrahydro-14-methyl-indolo[2’,3’:3,4]pyrido[2,1-b]quinazolin-5（7H）-one

CMP （hydrochloride） （10 mg） 1-（1’,4’-cyclohexadienyl）-2-methyl Aminopropane； N,

PF-299804 （10 mg） Dacomitinib|PF299； N-[4-[（3-chloro-4-fluorophenyl）amino]-7-methoxy-6-quinazolinyl]-4-（1-peridinyl）-（2E）-butenamide

2,3-Ethylone isomer （hydrochloride） （5 mg） 2,3-bk-MDEA isomer； 1-（benzo[d][1,3]dioxol-4-yl）-2-（ethylamino）propan-1-one, monohydrochloride

PTC-209 （5 mg） N-（2,6-dibromo-4-methoxyphenyl）-4-（2-methylimidazo[1,2-a]pyrimidin-3-yl）-2-thiazolamine

委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养生物素标记单甲基化组蛋白H3K27多肽 Biotinylated Monomethyl Histone H3K27 Peptide （200 ul）

Z-AEVD-FMK， Caspase-10YZ剂（氟基酮） Caspase-10 Inhibitor AEVD-FMK

KRX-0401 Perifosine （KRX-0401）

3-（2-Chlorophenyl）-N-（4-chlorophenyl）-N，5-dimethylisoxazole-4-carboxamide TGR5 Receptor Agonist

Beta-SecretaseYZ剂I Beta-Secretase Inhibitor I

3’-[α-Amino-p-methoxyhydrocinnamamido]-3’-deoxy-N，N-dimethyladenosine dihydrochloride EZSolution Puromycin Dihydrochloride

Lup-20（29）-ene-3b，28-diol Betulin

8，8’-[Carbonylbis[imino-3，1-phenylenecarbonylimino（4-methyl-3，1-phenylene）carbonylimino]]bis-1，3，5-naphthalenetrisulfonic acid hexasodium salt Suramin Hexasodium Salt

委内瑞拉链霉菌螺旋变种培养保藏方法：

1. 传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2. 液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3. 载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5. 冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。