香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai

香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传 

中文名称 香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai 

属名 Colletotrichum

种名加词 musae Penz.

收藏时间 2007-12-31

原始编号 ATCC36360

模式菌株 非模式菌株

主要用途 a:4:{i:0;s:4:分类;i:1;s:4:研究;i:2;s:4:教学;i:3;s:4:生产;}

特征特性 分生孢子盘黑褐色，圆形，135～240um。分生孢子梗较短，无色，瓶梗状。分生孢子长椭圆形，13.8～16.8um×5～6um，内含物颗粒状。在PDA上气生菌丝茂盛，初为白色，老熟时深灰色，菌落上产生橘黄色的分生孢子堆，无刚毛，不产生菌核，分生孢子尺度变化较大，11～38.5um×5～6um。主要侵害青果和熟果，尤以贮运期受害烈，损失Z大。叶片、花、苞叶、果梗和果轴上也受侵害。青果受害，以菌丝体潜伏在青果表皮下，长时间不表现症状，进行潜伏侵染。待到采后果实开始发黄和软熟时，在果皮、果柄上开始出现黑色或黑褐色斑点，呈芝麻点状，随后斑点扩大形成中间下陷，略呈梭形的黑褐斑块，有时有同心轮纹，往往ZY纵裂。有些斑块扩展迅速，常汇合成不规则的大斑块，严重时整个果面的果皮变黑，果肉腐烂；潮湿条件下，黑褐色斑块表面形成许多粉红色至深红色的黏质状小点（病菌分生孢子盘和分生孢子）。果轴、果柄、苞叶等部位受害同样出现黑褐色小病块，扩大后全部变黑、干缩或腐烂，后期亦可产生粉红色黏质小黑点。叶片受害，病斑长椭圆形或不规则，大小不等，斑边褐色稍深，交界不明显。分生孢子盘为黑色小点状，香蕉生长后期病斑上布满小黑点。<已复核>

具体用途 教学科研，分类

生物危害程度 四类

香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤CJ：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 

香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h

香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai菌株操作：

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。

香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品Pai保藏方法：

1. 传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2. 液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3. 载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5. 冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

AAV-293(人胚肾细胞) Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤细胞)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae 酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

白色绿僵菌 metarhizium album 香菇 Lentinula edodes

人肺动脉成纤维细胞完全培养基 人套细胞淋巴瘤细胞

 细胞名称 HT-29, 人结肠细胞

鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus 异常汉逊酵母异常变种 Hansenula anomala var. anomala

铜绿假单胞菌 Pseudomonas pyocynaea 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

RIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 苜蓿中华根瘤菌

异常汉逊酵母 Hansenula anomala SKOV3/Taxol-25, 人卵巢紫杉醇耐药细胞株

紫褐小单孢菌 Micromonospora violaceofusca 无花果曲霉 Aspergillus ficuum

大鼠肾管状上皮细胞完全培养基 灵芝 Ganoderma lucidium

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis 巴固氮螺菌 Azospirillum brasilense PKF115-584； Cal-C Calphostin C

2-Bromo-N-[3-[（1-oxobutyl）amino]phenyl]benzamide ML161

Annexin V-EGFP Reagent Annexin V-EGFP Reagent

Heparin Sepharose Heparin Sepharose

11-deoxojervine EZSolution Cyclopamine

香蕉炭疽菌（米蕉潜伏炭疽菌）品PaiL- 天冬素 L-asparagine

DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 3.5 kDa

Leukotriene B4 Lipid Maps MS Standard (500 ug) LTB4, Leukotriene B4 Lipid Maps MS Standard, 5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,1E,14Z-eicosatetraenoic acid

Lovastatin (25 mg) Lovastatin, 2-methyl-1S,2,3R,7S,8S,8aR-hexahydro-3,7-dimethyl-8-[2-[(2R,4R)-tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl]ethyl]-1-naphthalenyl ester, butanoic acid

MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg) MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite, (1-(5-fluoro-4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methylnaphthalen-1-yl)methanone

15(S)-HETE-d8 (500 ug) 15(S)-HETE-d8, Techin

25I-NBOMe (hydrochloride) (1 mg) 25I-NBOMe, 4-iodo-2,5-dimethoxy-N-[(2-methoxyphenyl)methyl]-benzeneethanamine, monohydrochloride