50T 李斯特菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒

实时荧光定量PCR：

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：

1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性的定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物LX考核、病原体检测等诸多领域。

服务流程：

1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)李斯特菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。

Acetyl-CoA carboxylase 1二

Sterol regulatory element-binding protein 11,2-二基

Esophageal Cancer Related Gene 22,3-二基

Lysophosphatidylcholine Acyltransferase24-溴

Notch Homolog 35-氧基

Lipid transfer protein25-

High Mobility Group AT Hook Protein 25-溴代

Lyme IgM Antibody6-

Lyme Antibody2-苯基

Tsukushin1-基-2-苯基

狼（月腺大戟）半糖凝集素-3抗体规格:96T/原装、分装

湖北贝母神生长相关蛋白-43规格:96T/原装、分装

干蟾皮3-磷甘油脱酶规格:96T/原装、分装

千里光G蛋白偶受体-2抗体规格:96T/原装、分装

仙鹤草胃泌素/蛙皮素抗体规格:96T/原装、分装

没(天然没)生长终止特性同源盒因抗体规格:96T/原装、分装

灵芝（赤芝）谷半胱γ合成酶抗体规格:96T/原装、分装

陈皮粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子抗体规格:96T/原装、分装

产品特点：

     全新的热启动DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶，可在PCR反应的过程中YZ非特异扩增，从而ZD限度地减少非特异性扩增产物的产生，提高荧光定量PCR反应的特异性；

    采用新型的荧光染料EvaGreen，与传统荧光染料相比，对PCR反应YZ更小，而且荧光信号更强，检测灵敏度更高；
    含有UNG的试剂盒可以防止PCR产物污染体系，进而有效防止实验过程中PCR产物的交叉污染；
TaqMan荧光定量PCR试剂盒提供了除引物、探针、模板外的所有实验所需组分，并配备2×Buffer，可完成不同类型荧光探针的实时荧光定量PCR反应，方便用户使用；
    试剂盒的通用性强，可适用于Roche的Light Cycler、ABI各型实时荧光定量PCR仪和。