Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-541操作步骤

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细胞名称Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-541操作步骤
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使Du145细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
传代方法  1:4~1:6传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,y；CSF1PO：10,11；D12S391：18,21；D13S317：12,14；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：12,13；D21S11：30,31,33；D2S1338：16,16；D3S1358：16,16；D5S818：10,13；D6S1043：10,11；D7S820：7,10,11；D8S1179：13,14；FGA：22,22；Penta E：12,14；TH01：7,7；TPOX：11,11；vWA：17,18；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-541操作步骤操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-541操作步骤温馨提示:
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Piperazine-N,N'-bis(2-hydroxypropanesulphonic acid) disodium salt    嗪-N,N-双(2-羟基丙烷磺酸)二    108321-07-9
D(-)-Asparagine monohydrate    D-天冬酰胺一水物    5794-24-1
4-Methylphenethylamine    对基乙胺    3261-62-9
GLYCOCHENODEOXYCHOLIC ACID SODIUM SALT    甘氨鹅脱氧胆酸    16564-43-5
SODIUM CARBONATE, MONOHYDRATE    一水碳酸    5968/11/6
ZINC STANNATE    锡酸锌    12036-37-2
Platinum bis(acetylacetonate)    乙酰丙铂(II)    15170-57-7
N,N-DIMETHYL-3-NITROANILINE    N,N-二基-3-基胺    619-31-8
Stannous pyrophosphate    焦磷酸亚锡    15578-26-4
Cichoric acid    菊苣酸    70831-56-0
3-PHENYL-3-METHYLTHIOANILINE    3-硫基    151386-72-0
4-Methyl-2-oxovaleric acid    4-基-2-氧酸    816-66-0
5-Bromoisoquinoline    5-溴异喹啉    34784-04-8
Tryptic Soy Broth Wi    10%化胰酪胨大豆肉汤    
3-Bromo-1,1,1-trifluoroacetone    3-溴-1,1,1-三丙    431-35-6
H-D-ALA-OBZL P-TOSYLATE    D-丙氨酸苄酯对磺酸    41036-32-2
2-Ethylfuran    2-乙基呋喃    3208-16-0
BENZO[C]CINNOLINE    并[c]噌啉    230-17-1
P-(METHYLTHIO)PHENYLACETONITRILE    4-硫基乙    38746-92-8
1,3-Diphenylacetone    二苄基    102-04-5
N,N'-Di-Boc-L-lysine hydroxysuccinimide ester    N,N'-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸 N-丁二酰亚胺酯    30189-36-7
4-FLUOROPHENYL ISOTHIOCYANATE    4-基异硫酸酯    1544-68-9
(S)-(+)-2,2-Dimethylcyclopropanecarboxamide    (S)-(+)-2,2-二基环丙烷酰胺    75885-58-4
大鼠肾动脉平滑肌细胞完全培养基100mL
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
大丽花轮枝孢
小鼠角膜上皮细胞完全培养基100mL
人腺成纤维细胞完全培养基100mL
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2
汤卜逊沙门氏菌 Salmonella thompson
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
JAR(人胎盘绒毛膜细胞)5×106cells/瓶×2
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
白孢链霉菌 Streptomyces albosporeus
蛋白银染试剂盒50次国产
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-541操作步骤麦芽糖假丝酵母 Candida maltosa
牛肝菌 Boletus sp.
小鼠树突状细胞肉瘤细胞英文名称：DCS
人肾动脉内皮细胞完全培养基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum