蛋白质测定仪分析荞麦蛋白质的种类
蛋白质测定仪法是测定食品、饲料和种子蛋白质含量测定zui常用的方法。此方法较为准确,但是采用这种方法复杂、费时、试剂多、消化时还产生有害气体,危害操作者的身体健康。特别是蒸馏定氮过程的效率低,不利于对大批量样品进行快速测定。
根据荞麦四种蛋白清蛋白、球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白的溶解性不同,可采用不同的溶剂把四种蛋白质分别提取出来。zui常用的方法有直接提取法和顺序提取法。
直接提取法又叫一次提取法,即随机选取部分种子,去壳、粉碎后混匀,加入适量的双蒸水,采用超声波提取技术提取清蛋白,5000r/min离心20min,测定上清液中蛋白质的含量;而球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白提取的步骤与水溶蛋白提基本相同,仅提取液不同,分别为NaCl、弱酸或弱碱、乙醇,提取剂的浓度不
同提取得率也有很大差别,蛋白质含量的测定可以使用全自动定氮仪进行测定分析。此法主要研究种子在不同提取液的情况下蛋白质谱带的带型。电泳过程中可以观察到出现在水溶蛋白电泳图谱中的蛋白条带,也会在盐溶、酸溶和醇溶蛋白的图谱中出现。表明运用直接提取法对盐溶、酸溶和醇溶蛋白进行提取时,它们易受到水溶蛋白的污染,因此这种提取方法是不严格的。
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