逆转录病毒包装的NIH3T3细胞,PA317细胞

逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 , PA317细胞5×10^5以上/1ml
对于大多数细胞研究工作者来说，逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 , PA317细胞污染那可是个糟糕的事情，也是比较容易出现的情况，我们如何防范，如何避免，是我们要学习和掌握的。
猴白介素-6 （monkey IL-6） ELISA 96T 奥地利Bender
猴白介素-8 （monkey IL-8） ELISA 96T 奥地利Bender
逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 , PA317细胞猴白介素-10 （monkey IL-10） ELISA 96T 奥地利Bender
猴白介素-12 （monkey IL-12） ELISA 96T 奥地利Bender
monkey sPECAM-1 ELISA Kit ELISA 96T 奥地利Bender
猴可溶性E-选择素 （monkey sE-selectin） ELISA 96T 奥地利Bender
兔S100b ELISA 48T/96T 进口分装 
 下面我们对细胞培养中常见的污染情况，做个总结：
1）原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，zui终形成恶性循环。
2）霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
3）细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应的抗生素处理
4）黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。
5）真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。
6）支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中（不加细胞），37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。 也可以在培养基中事先加入双抗（硫酸链霉素和氨苄青霉素）。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。1、孵箱应定期用三氧机消毒或者 紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素3、超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水喷洒中和，约几小时即可进入操作。
兔转化生长因子-β1 （rabbit TGF-b1） ELISA 48T/96T 进口分装
兔血栓调节蛋白（rabbit TM） ELISA 48T/96T 进口分装
兔肿瘤坏死因子-a （rabbit TNF-a） ELISA 48T/96T 进口分装
兔血管细胞粘附分子-1 （rabbit VCAM-1） ELISA 48T/96T 进口分装
兔血管内皮生长因子 （rabbit VEGF） ELISA 48T/96T 进口分装
兔血管性血友病因子（rabbit VWF） ELISA 48T/96T 进口分装
猪促肾上腺皮质激素 （Swine ACTH） ELISA 48T/96T 进口分装
猪内皮素-1（Swine ET-1） ELISA 48T/96T 进口分装
猪干扰素-g （Swine IFN-g） ELISA 48T/96T 进口分装
猪胰岛素样生长因子-1 （Swine IGF-1） ELISA 48T/96T 进口分装
猪白介素-10 （Swine IL-10） ELISA 48T/96T 进口分装
猪白介素-12 （Swine IL-12） ELISA 48T/96T 进口分装
猪白介素-1β（Swine IL-1β） ELISA 48T/96T 进口分装
猪白介素-2（Swine IL-2） ELISA 48T/96T 进口分装
猪白介素-4（Swine IL-4） ELISA 48T/96T 进口分装
猪白介素-6 （Swine IL-6） ELISA 48T/96T 进口分装
猪胰岛素（Swine Insulin） ELISA 48T/96T 进口分装
猪瘦素（Swine Leptin） ELISA 48T/96T 进口分装
猪瘦素受体（Swine Leptin receptor） ELISA 48T/96T 进口分装
猪转化生长因子-β1 （Swine TGF-b1） ELISA 48T/96T 进口分装
猪转化生长因子-β2 （Swine TGF-b2） ELISA 48T/96T 进口分装
猪肿瘤坏死因子-a （Swine TNF-a） ELISA 48T/96T 进口分装
猪血管内皮生长因子 （Swine VEGF） ELISA 48T/96T 进口分装
猴细胞间粘附分子-1 （monkey sICAM-1） ELISA 96T 奥地利Bender
猴干扰素-r （monkey IFN-r） ELISA 96T 美国Biosource
猴IgG（monkey IgG） ELISA 96T 美国ADI
猴IgM（monkey IgM） ELISA 96T 美国ADI
猴白介素-1b （monkey IL-1b） ELISA 96T 奥地利Bender
猴白介素-2 （monkey IL-2） ELISA 96T 奥地利Bender
猴白介素-4 （monkey IL-4） ELISA 96T 美国Biosource