上海博研生物zui专业的“F81细胞,猫肾细胞”代理商,提供细胞的报价,咨询。 咨询选购。
产品名称:F81细胞,F81细胞
产品用途:科研
保证运输中细胞的正常生长,关于其价格、报价、货期,请咨询我们。
产品特点:活性好、存活率高、实验成果特征明显
产品来源:人组织、小鼠组织、大鼠组织、兔组织等动物组织
产品运输:免费快递
产品包装:瓶装
产品用途:细胞培养研究
细胞周期的DNA检测
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品
A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、、胎盘细胞)
B、组织培养细胞
C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞
Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液
柠檬酸三钠 0.25g
Triton-X 100 0.75ml
Propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸馏水 250ml
我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失
Ⅲ、染色
1、 每一个管子中放入1×106个细胞;
2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀块; 3、 入1ml的DNA低渗染色(可用甲基绿进行染色)缓冲液至沉淀中,并混匀;
4、 样品于4℃下避光30分钟或zui长不超过1个小时以备流式细胞仪分析 。
注意:延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加
F81细胞,F81细胞传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
邮购备注: 收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若有悬浮的细胞,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清,刚接到细胞时血清浓度可以在15%。本产品经过了细菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体检测。
我们将为客服提供全面的细胞计数、细胞染色、(MTT)比色法、细胞培养、细胞污染、常规生物材料细胞毒性实验等等细胞实验技术服务。
细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
具体操作 (一)实验前准备: 1.将水浴锅预热至37℃ 2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
(二)取出冻存管: 1.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。 2.从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。
(三)迅速解冻: 1.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。 2.约1-2min后冻存管内液体完全溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。
(四)平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心3min。
(五)制备细胞悬液: 1.吸弃上清液。 2.向离心管内加入10ml培养液,吹打制成细胞悬液。 (六)细胞计数: 细胞浓度以5×105/ml为宜。
(七)培养细胞 将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
初学者易犯错误: 1.水浴锅未预热或者未预热到37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
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