简介:TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并YZ细胞释放出的核酸酶。 TRIzol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化DNA及标准化RNA的生产十分有用。Trizol Reagent
简介:TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并YZ细胞释放出的核酸酶。
TRIzol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化DNA及标准化RNA的生产十分有用。
TRIzol的成分:
TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全YZRNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来YZ内源和外源RNase(RNA酶)。
※0.1%的8-羟基喹啉可以YZRNase,与氯仿联合使用可增强YZ作用。
※异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类QL的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。
※β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。
TRIzol的使用方法:
用匀浆器将组织磨碎,加入TRIzol处理组织。5分钟后加入氯仿,以每分钟12000转离心5分钟,样品即分成水样层、中间层和有机层。
※RNA存在于水样层中,收集水样层后可以通过异丙醇沉淀RNA来还原。
※在除去水样层后,有机层中的DNA和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原:乙醇能使中间层的DNA沉淀析出,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。
每100ml TRIzol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(约五百万个)及大量的组织(≥1g)和细胞(超过一千万个)均有较好的分离效果。
每一百万细胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA,每毫克组织用TRIzol抽提可得1-10微克RNA(产量因细胞和组织不同而异)。
TRIzol操作上的简便性允许其同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。
TRIzol抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白质的污染,故而能够作RNA 印迹分析、斑点杂交、poly(A)+ 选择、体外翻译、RNA酶保护分析和单分子克隆(PCR)。
※如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用级联扩大的DNase I(Cat. No. 18068)来处理抽提的总RNA。
※TRIzol试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7kb和15kb之间的不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体RNA条带位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时,其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。
TRIzol对人体有害,使用时应戴一次性手套,注意防止溅出。
Invitrogen相关资料:
Invitrogen一步法总RNA提取试剂/Trizol Reagent
使用Invitrogen公司的TRizol试剂,可快速简单地获得高纯度总RNA。
Invitrogen公司的一步法总RNA提取试剂TRIZOL比其他纯化方法可提高产率30%-150%。这种TRIZOL试剂的酚和异硫氰酸胍的均相溶液可直接用于从人类、动物、植物、细菌等的细胞或组织中提取总RNA、DNA或蛋白质。
TRIZOL试剂纯化的RNA可用于PCR、RNA印迹分析、poly(A)+筛选或斑点杂交。纯化的DNA和蛋白质分别适用于DNA和蛋白质印迹分析。
◆ 获得高纯度RNA(A260/A280>1.9)
◆ 在1小时内分离RNA;在3小时内分离DNA或蛋白质
◆ 鲜明的红色染料使去除含RNA的液相简单便捷
◆ 无论是小量的细胞(5×106)或组织(50-100mg)还是大量的细胞(107)或组织(>1g)都可得到出色的结果
◆ 在4℃条件下可稳定保存两年以上
◆ 可使用TRIZOL用于组织或细胞;使用TRIZOL LS用于血液或其他液体样品
品名: TRIzol Reagent
Cat. No. 15596-026
TRIzol® Reagents are ready-to-use, monophasic solutions of phenol and guanidine isothiocyanate suitable for isolating total RNA, DNA, and proteins (1-6). Isolation procedures are based upon improvements to the single-step RNA isolation method
General Specifications
Brand | TRIzol® |
Final Product | Transcriptome RNA micro RNA Total RNA |
High Throughput Compatibility | Manual Protocols |
Isolation Technology | Organic Extraction |
Number of Reactions | 100 Preps |
Product Size | 100 ml |
Purification Time | 1 hr |
Quantity | 1 |
Sample Type (General) | Viral Samples Plant Samples Tissue Blood Bacteria Yeast Cells |
Scale | Scaleable |
Starting Material (Cell #) | Up to 1g Tissue, Up to 1 x 10^7 cells |
System | TRIzol |
Yield (up to) | 8 mg |
Top Contents & Storage:
TRIzol® and TRIzol® LS Reagents include the indicated amount of reagent. The TRIzol® Max™ Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol® Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.
品名 | 产地 | 货号 | 规格 | 单价 | 备注 |
TRIzol Reagent;TRIzol ;一步法总RNA提取试剂 | Invitrogen | 15596-026 | 100ml | 询价 | 现货 |
温馨提示:不可用于临床ZL。