信号转导和转录活化因子放免药盒操作说明书

信号转导和转录活化因子放免药盒操作说明书
                              STAT1（HY-H0059） RIA  KIT
      信号转导和转录活化因子(signal transducer and activator of transcription，STAT)介导的信号转导有别于传统的信号级联转导系统，无需细胞内蛋白作为信使，直接将细胞外的信号传至细胞核内，从而调节细胞的增殖、分化和凋亡等重要生理活动。信号转导子与转录活化因子1(STAT 1)是连接多种细胞膜受体与选择性效应器之间信号转导的重要蛋白,STAT 1的水平及其活性变化调节着许多生理、生化、免疫反应以及与其相关基因表达,在细胞对细胞因子的应答、细胞活化、细胞分裂及细胞增殖中起重要的作用,而且STAT1是STAT家族中WY可能对肿瘤细胞的生长起负性调节作用的蛋白.
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 STAT1缓冲液（PBS）1瓶
2、 PR分离剂（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3、 STAT1标准品5瓶，浓度为0.625、1.25、2.5、5、10、20、40ng/ml
4、 STAT1抗体1瓶。
5、 ¹²⁵I - STAT1  2瓶（冻干品）。
信号转导和转录活化因子放免药盒操作说明书样品收集：
    取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min 离心5 min，取上清测定。
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
                       STAT1  RIA加液程序    （单位： ul ）
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              试   剂         T     NSB      S0     S1~S7    样  品
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              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品      ——    ——    ——    ——       100
              抗    体     ——    ——    100     100       100
    ¹²⁵I-STAT1      100     100     100     100       100
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                              摇匀4℃ 放置24小时
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              分 离 剂    ——   500      500     500       500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
信号转导和转录活化因子放免药盒操作说明书注意事项：   
      本月标准品每瓶用   0.5       ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用   10     ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用  5.0     ml缓冲液稀释
      本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<6%。
2、 灵敏度：<0.1ng/ml。
3、 标准曲线范围：0.625~40ng/ml。
4、 批内变异系数：CVw<7.0 %；
      批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                 2.5-4.8ngmlL
本月药盒参考数据：
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         T     NSB     S0       S1      S2      S3      S4        S5     
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 CPM
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        N/T%          B0/T%        B/ B0 %   
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