脂氧化酶5放免试剂盒说明书
LOX-5(HY-10219) RIA KIT
脂氧化酶(lipoxygenase-5,LOX-5) 作为花生四稀酸代谢的重要限速酶,与多种肿瘤的发生关系密切。5-LOX 在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达存在明显差异,在侵袭力更强的恶性肿瘤组织中表达更明显。5-LOX可将花生四烯酸、亚油酸及其它PUFA 转变成具有生物活性的代谢产物,从而影响细胞的结构、代谢及调控,参与机体细胞多种酶、离子通道和生物活性物质生成的调节,并与肿瘤的发生密切相关。5-脂氧合酶催化花生四烯酸(AA)转化生成5-氢过氧化廿碳四烯酸(5-HPETE),后者被氧化成白三烯A4(LTA4),LTA4再在其他酶类催化下生成LTB4、LTC4、LTD4和LTE4,白三烯类代谢物在过敏性疾病、炎症性疾病、心脑血管疾病和部分肿瘤的发SF展中起重要作用],而其在肝脏疾病中的作用近年获得重视. 5-LOX是白三烯类代谢物生成的关键酶,
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围:
* 肿瘤的研究;
* 过敏性疾病的研究;
* 炎症性疾病的研究
* 心脑血管疾病的研究
脂氧化酶5放免试剂盒说明书 药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. LOX-5缓冲液1瓶
2. LOX-5(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. LOX-5标准品5瓶,浓度为0.5、1、2.5、5、10 ng/ml
4. LOX-5抗体 1瓶。
5. 125I –LOX-5 1瓶
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
LOX-5 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- LOX-5 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
脂氧化酶5放免试剂盒说明书注意事项:
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<0.05 ng/ml。
3、 标准曲线范围:0.5-10ng/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:2.5±1.8ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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