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小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒测试原理
测试原理本试剂盒采用夹心酶免疫分析。微量滴定板设置在该试剂盒已预先涂有特定的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体。标准或样品,然后添加到适当的微量滴定板的威尔斯用生物素标记的抗体胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。其次,亲和素辣根过氧化物酶(HRP)添加到每个微孔板以及培养。加入TMB底物溶液,只有威尔斯含有胶质纤维酸性蛋白(GFAP),生物素标记的抗体和酶标记的抗生物素蛋白会表现出改变颜色。酶的底物反应的硫酸溶液的添加和色彩变化的分光光度法在波长450nm±10nm测量终止。胶质纤维酸性蛋白(GFAP)浓度的样品中,然后通过比较样品的外径为标准曲线测定。
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒注意事项:
◆ 每个标本量收集体积= 100ul × 检测种类,如要做复孔,标本量收集体积= 100ul × 检测种类×2 。
◆ 对于作某一个具体指标来说,先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个最适稀释度测定即可。
◆ 收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时, -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
◆ 血清标本采集时,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
◆ 为了保证尿液检测结果的准确性,必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。
使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用药并清洗不干净而造成的污染,影响
检测结果。尿液标本必须新鲜,留取后,应及时检测或保存,以免细菌繁殖。因在室温
中久置后(尤其是夏季)尿中磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。
◆ 标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性
反应。保存过久可发生聚合在
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒中可使本底加深。
◆ 冻结标本融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
◆ 混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆ 反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。也可加入适当防腐剂。