酶联免疫(ELISA)使用试剂盒检测过程中值得关注的问题
1、
小鼠儿茶酚胺(CA)检测试剂盒酶标分析过程中的注意事项
样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本ZZ的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。
2常见加样方式
A、吸一打二
B、吸二打一
在实际操作过程中,提倡用“吸二打一”用这种方式,有如下几个好处:
a、加样过程中在板孔内不出现或者很少出现气泡
b、提高加样速度,缩短前后样本反应的时间差。
在加样的过程中还应细心注意避免出现下列现象:
A、加样的过程中漏加或者重加;
B、加样的过程中忘记更换吸头;
C、样本的重加或者漏加;
D、忘记记录样本的加样顺序。
3
小鼠儿茶酚胺(CA)检测试剂盒常见的洗板方式
A、洗板机洗板;
B、多道孔加样器洗板;
C、多孔吸头洗板;
在洗板的过程中,确保每孔所加洗涤液量的均一,按说明书操作,不可过多,避免溢出板孔,污染其它样本;过少,则达不到洗涤的效果,容易出现曲线不成线性,花板等情况。
4 甩板
快速甩尽板孔内的液体,防止板孔里的液体对流或反溅回板孔中产生交叉污染。
5拍板
轻轻的在吸水纸上扣干板孔内的液体,而且吸水纸只能使用一次。
6 显色
值得注意的是,并非试剂盒中所规定的显色时间是JD的,因为
小鼠儿茶酚胺(CA)检测试剂盒的吸光度值会受环境中的温度、湿度、酶标板反应时所接触到的物品的导热度等有关,实验操作人员在加完显色液后,可根据颜色的深浅适当的延长或者缩短显色时间。防止出现吸光值接近或高于酶标仪的ZG检测灵敏度(OD值在2.5-3.0之间),这样会间接影响到检测结果,如出现曲线前半部份梯度不明显或颠倒数值等现象,也就造成了一些假阳性或部分检测结果偏低的现象。
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