人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP) 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用 

AFP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知AFP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AFP物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AFP的活性浓度呈比例关系。

 

 

1．  蒸馏水。

2．  加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．  振荡器及磁力搅拌器等。

 

1．  避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．  不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

1．  试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．  实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．  不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4．  使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．  使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．  洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．  底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8．  加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．  按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

1、  血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、  血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、  细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、  保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

1．  标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

 

2．  洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

 

1．  使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2．  根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3．  加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4．  甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5．  每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6．  甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7．  每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8．  取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9．  在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

 

 

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的AFP标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的AFP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

 

3、检测值范围：0-400ng/ml

 

4、敏感度： 1.0ng/ml
中文名称：人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
中文名称：人酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1)
中文名称：人成纤维细胞生长因子4(FGF4)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)
中文名称：人成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6)
中文名称：人成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)
中文名称：人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Fibronectin (FN)
中文名称：人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand (Flt3L)
中文名称：人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for FMS Like Tyrosine Kinase 3 (Flt3)
中文名称：人趋化因子C-X3-C-基元配体1(CX3CL1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)
中文名称：人中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Neutrophil Activating Protein 3 (NAP3)
中文名称：人粒细胞集落刺激因子(GCSF)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
中文名称：人胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor 
中文名称：人生长激素(GH)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Growth Hormone (GH)
中文名称：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte 
中文名称：人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Glucoprotein 130 (gp130)
中文名称：人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)
中文名称：人细胞间粘附分子1(ICAM1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1)
中文名称：人干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg)
中文名称：人生长抑素(SST)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Somatostatin (SST)
中文名称：人胃动素(MTL)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Motilin (MTL)
中文名称：人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)
中文名称：人碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Carbonic Anhydrase I (CA1)
中文名称：人内皮脂肪酶(LIPG)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Lipase, Endothelial (LIPG)
中文名称：人妊娠关联血浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA)
中文名称：人高迁移率族蛋白1(HMG1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
中文名称：人转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Receptor I 
中文名称：人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
中文名称：人YZ素A(INHA)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Inhibin A (INHA)